組織胚胎學(xué) 緒論

組織學(xué)組織學(xué) 緒論緒論組胚教研室：劉玉榮組胚教研室：劉玉榮第一章組織學(xué)緒論提提 要要 組織學(xué)的內(nèi)容和意義組織學(xué)的內(nèi)容和意義 組織學(xué)發(fā)展史和當(dāng)代組織學(xué)組織學(xué)發(fā)展史和當(dāng)代組織學(xué) 組織學(xué)的學(xué)習(xí)方法組織學(xué)的學(xué)習(xí)方法 組織學(xué)技術(shù)簡(jiǎn)介組織學(xué)技術(shù)簡(jiǎn)介一、組織學(xué)的內(nèi)容和意義一、組織學(xué)的內(nèi)容和意義人體解剖學(xué)人體解剖學(xué)光學(xué)顯微鏡光學(xué)顯微鏡 放大放大40倍倍 組織學(xué)研究哪些內(nèi)容？組織學(xué)研究哪些內(nèi)容？放大放大400倍倍細(xì)胞細(xì)胞什么是組織？ 細(xì)胞群+細(xì)胞外基質(zhì)上皮組織上皮組織結(jié)締組織結(jié)締組織肌組織肌組織神經(jīng)組織神經(jīng)組織：四大基本組織以不同的種類、數(shù)量和方式組合形成器官。：四大基本組織以不同的種類、數(shù)量和方式組合形成器官。 器官器官小腸HE切片組組 織織學(xué)好組織學(xué)的意義學(xué)好組織學(xué)的意義 促進(jìn)了生理學(xué)的進(jìn)步促進(jìn)了生理學(xué)的進(jìn)步 是病理學(xué)的基礎(chǔ)是病理學(xué)的基礎(chǔ) 促進(jìn)人類對(duì)自身的深入了解促進(jìn)人類對(duì)自身的深入了解二、組織學(xué)發(fā)展史和當(dāng)代組織學(xué)二、組織學(xué)發(fā)展史和當(dāng)代組織學(xué)1、光學(xué)顯微鏡、光學(xué)顯微鏡簡(jiǎn)稱光鏡（簡(jiǎn)稱光鏡（light microscope，LM） 1590年前后，荷蘭眼鏡年前后，荷蘭眼鏡匠詹森（匠詹森（H.Janssen）發(fā)）發(fā)明了世界上第一臺(tái)光學(xué)顯明了世界上第一臺(tái)光學(xué)顯微鏡微鏡 。 1665年英國(guó)科學(xué)家羅伯年英國(guó)科學(xué)家羅伯特特胡克改進(jìn)了復(fù)式顯微鏡，胡克改進(jìn)了復(fù)式顯微鏡，并發(fā)現(xiàn)了植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)。并發(fā)現(xiàn)了植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)。cell 意大利人馬爾比基觀意大利人馬爾比基觀察了脾、肺、腎、表察了脾、肺、腎、表皮；皮； 列文虎克發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞、列文虎克發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞、精子、肌纖維；精子、肌纖維； 格拉夫發(fā)現(xiàn)卵泡格拉夫發(fā)現(xiàn)卵泡 1801 年比沙提出年比沙提出“組組織織”概念概念精子涂片精子涂片卵泡光鏡圖卵泡光鏡圖紅細(xì)胞血涂片紅細(xì)胞血涂片提出：施萬、施萊登（提出：施萬、施萊登（1838、1839）內(nèi)容：細(xì)胞是一切動(dòng)、植物體的基本結(jié)構(gòu)內(nèi)容：細(xì)胞是一切動(dòng)、植物體的基本結(jié)構(gòu)和功能單位；細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行著復(fù)雜的化學(xué)反和功能單位；細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行著復(fù)雜的化學(xué)反應(yīng)；新細(xì)胞由原有細(xì)胞產(chǎn)生應(yīng)；新細(xì)胞由原有細(xì)胞產(chǎn)生2、細(xì)胞學(xué)說、細(xì)胞學(xué)說3、電子顯微鏡、電子顯微鏡簡(jiǎn)稱電鏡（簡(jiǎn)稱電鏡（electron microscope, EM） 發(fā)明：發(fā)明：1932 年年 盧斯卡、盧斯卡、科諾爾，使分辨率提高到科諾爾，使分辨率提高到 0.2nm 超薄切片術(shù)（超薄切片術(shù)（5080nm） 超微結(jié)構(gòu)超微結(jié)構(gòu)（ultrastructure）：即細(xì)）：即細(xì)胞膜、細(xì)胞器、染色體等胞膜、細(xì)胞器、染色體等亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)4、當(dāng)代組織學(xué)、當(dāng)代組織學(xué) 新儀器、新技術(shù)的發(fā)明和應(yīng)用新儀器、新技術(shù)的發(fā)明和應(yīng)用 免疫組織化學(xué)技術(shù)、原位雜交技術(shù)將組免疫組織化學(xué)技術(shù)、原位雜交技術(shù)將組織學(xué)引入分子水平織學(xué)引入分子水平 組織工程學(xué)技術(shù)拓展了組織學(xué)的臨床應(yīng)組織工程學(xué)技術(shù)拓展了組織學(xué)的臨床應(yīng)用前景用前景1.1. 審視角度審視角度 組織水平組織水平：層次順序、特征性結(jié)構(gòu)和細(xì)胞：層次順序、特征性結(jié)構(gòu)和細(xì)胞 細(xì)胞水平細(xì)胞水平：主要細(xì)胞的分布、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)（含重要細(xì)胞：主要細(xì)胞的分布、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)（含重要細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)）及功能的超微結(jié)構(gòu)）及功能2. 形態(tài)和結(jié)構(gòu)相統(tǒng)一形態(tài)和結(jié)構(gòu)相統(tǒng)一 結(jié)構(gòu)是功能的基礎(chǔ)，功能是結(jié)構(gòu)的必然表現(xiàn)結(jié)構(gòu)是功能的基礎(chǔ)，功能是結(jié)構(gòu)的必然表現(xiàn)3.3.培養(yǎng)培養(yǎng)觀察能力：觀察能力：重視實(shí)習(xí)課和圖像觀察重視實(shí)習(xí)課和圖像觀察 培養(yǎng)空間思維能力：將二維圖形還原為三維構(gòu)像培養(yǎng)空間思維能力：將二維圖形還原為三維構(gòu)像三、如何學(xué)好組織學(xué)三、如何學(xué)好組織學(xué)四、組織學(xué)技術(shù)簡(jiǎn)介四、組織學(xué)技術(shù)簡(jiǎn)介（一）光鏡技術(shù)（一）光鏡技術(shù) 石蠟切片術(shù)石蠟切片術(shù)（paraffin sectioning）：）：取材、固定、脫取材、固定、脫水、包埋、切片（水、包埋、切片（5 10 m 厚）、染色厚）、染色 蘇木精蘇木精- 伊紅染色法伊紅染色法（hematoxylin-eosin staining， HE染色法染色法）：）：蘇木精為堿性染料，使染色質(zhì)和核糖體著蘇木精為堿性染料，使染色質(zhì)和核糖體著紫藍(lán)色；伊紅為酸性染料，使胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)著紅紫藍(lán)色；伊紅為酸性染料，使胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)著紅色色 嗜酸性嗜酸性（acidophilia) )： 易被酸性染料著色的結(jié)構(gòu)易被酸性染料著色的結(jié)構(gòu) 嗜堿性嗜堿性(basophilia) )：易被酸性染料著色的結(jié)構(gòu)易被酸性染料著色的結(jié)構(gòu) 特殊染色特殊染色 HE HE染色，垂體遠(yuǎn)側(cè)部染色，垂體遠(yuǎn)側(cè)部（二（二 ）電鏡技術(shù)）電鏡技術(shù)1、透射電鏡術(shù)、透射電鏡術(shù)（transmission electron microscopy, TEM） 用于觀察組織細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)用于觀察組織細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu) 戊二醛、鋨酸雙重固定戊二醛、鋨酸雙重固定樹脂包埋樹脂包埋超薄切片（超薄切片（50 80nm 厚）厚）電子染色（醋酸鈾、檸檬酸鉛）電子染色（醋酸鈾、檸檬酸鉛） 根據(jù)電子束在不同結(jié)構(gòu)上被散射程度的差異表現(xiàn)為根據(jù)電子束在不同結(jié)構(gòu)上被散射程度的差異表現(xiàn)為電子密度高（黑或深灰色）和電子密度低（淺灰色）電子密度高（黑或深灰色）和電子密度低（淺灰色）透射電鏡圖，漿細(xì)胞透射電鏡圖，漿細(xì)胞2、掃描電鏡術(shù)、掃描電鏡術(shù)（scanning electron microscopy, SEM） 用于觀察組織細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)，具有真實(shí)的用于觀察組織細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)，具有真實(shí)的立體感，無需制備切片立體感，無需制備切片圖圖8 8 掃描電鏡掃描電鏡圖圖，血細(xì)胞，血細(xì)胞 1、一般組織化學(xué)術(shù)：一般組織化學(xué)術(shù)：組織中的某種結(jié)構(gòu)成分與所加試劑發(fā)組織中的某種結(jié)構(gòu)成分與所加試劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)、并呈現(xiàn)某種顏色，在顯微鏡下可觀察到。生化學(xué)反應(yīng)、并呈現(xiàn)某種顏色，在顯微鏡下可觀察到。糖類：糖類： PAS（過碘酸（過碘酸-希夫）反應(yīng)，顯示多糖和糖蛋白，呈希夫）反應(yīng)，顯示多糖和糖蛋白，呈紫紅色。紫紅色。 （三）組織化學(xué)術(shù)（三）組織化學(xué)術(shù)過碘酸過碘酸紫紅色的反應(yīng)產(chǎn)物紫紅色的反應(yīng)產(chǎn)物糖糖 多醛多醛品紅硫酸復(fù)合物品紅硫酸復(fù)合物 （希夫試劑，無色）（希夫試劑，無色）圖圖9 PAS9 PAS反應(yīng)，小腸上皮杯狀細(xì)胞的黏原顆粒反應(yīng)，小腸上皮杯狀細(xì)胞的黏原顆粒2 2、免疫組織化學(xué)術(shù)、免疫組織化學(xué)術(shù)：圖圖10 10 免疫組織化學(xué)原理模式圖免疫組織化學(xué)原理模式圖圖圖11 11 免疫組織化學(xué)（熒光素標(biāo)記）免疫組織化學(xué)（熒光素標(biāo)記）毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞呈毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞呈vWFvWF陽性陽性 圖圖12 12 免疫組織化學(xué)（辣根過氧化物酶標(biāo)記免疫組織化學(xué)（辣根過氧化物酶標(biāo)記）胰島胰島B B細(xì)胞呈胰島素陽性細(xì)胞呈胰島素陽性圖圖13 13 免疫組織化學(xué)電鏡免疫組織化學(xué)電鏡圖圖示上皮細(xì)胞膜示上皮細(xì)胞膜MAMMAM6 6蛋白蛋白 （A A 膠體金標(biāo)記膠體金標(biāo)記 B B 辣根過氧化物酶標(biāo)記）辣根過氧化物酶標(biāo)記）圖圖14 14 原位雜交原位雜交 主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞呈彈性蛋白主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞呈彈性蛋白mRNAmRNA陽性陽性即核酸分子雜交組織化學(xué)術(shù)，檢測(cè)基因（即核酸分子雜交組織化學(xué)術(shù)，檢測(cè)基因（DNA片段）的有無、基因的表達(dá)活性（片段）的有無、基因的表達(dá)活性（mRNA）3、原位雜交術(shù)、原位雜交術(shù)圖圖17 17 體外培養(yǎng)的體外培養(yǎng)的HeLaHeLa細(xì)胞相差顯微鏡圖細(xì)胞相差顯微鏡圖4、細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)圖圖18 18 體外培養(yǎng)的平滑肌細(xì)胞體外培養(yǎng)的平滑肌細(xì)胞 （免疫組織化學(xué)染色顯示肌動(dòng)蛋白）（免疫組織化學(xué)染色顯示肌動(dòng)蛋白）圖圖19 19 實(shí)驗(yàn)中的組織工程耳實(shí)驗(yàn)中的組織工程耳5、組織工程、組織工程