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分子生物學(xué) 期末考試復(fù)習(xí)題.doc

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分子生物學(xué) 期末考試復(fù)習(xí)題.doc

一、判斷題1、原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的差別之一是前者無染色體結(jié)構(gòu),后者有染色體結(jié)構(gòu)。( )2、基因組是指某一種生物所具有的全部基因的總稱。( )3、真核生物基因的大小通常是外顯子的數(shù)目和長度決定的。( )4、在所有的真核生物中,內(nèi)含子的長度和序列是高度保守的。( )5、酵母的基因普遍要比人的基因小,因此,酵母基因組編碼的蛋白質(zhì)普遍要比人基因組編碼的蛋白質(zhì)要小。( )6、在自由的四種核苷酸混合溶液中,任何堿基之間都可以形成氫鍵而發(fā)生配對。 7、PCR只能擴(kuò)增雙鏈DNA,不能擴(kuò)增單鏈DNA。( )8、富含GC的DNA雙螺旋比富含AT的DNA雙螺旋穩(wěn)定的主要原因是GC堿基對比AT堿基對多一個(gè)氫鍵。( )9、用氯化銫梯度超離心純化質(zhì)粒DNA時(shí),蛋白質(zhì)在離心管的最上部,RNA懸浮在中間,而DNA沉在底部。( )10、mRNA的剪接總是產(chǎn)生套索結(jié)構(gòu)。( )11、岡崎片段只由DNA組成。( )12、端粒酶帶有自己的DNA模板。( )13、細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制既需要DNA聚合酶,也需要RNA聚合酶。( )14、同源重組和位點(diǎn)特異性重組都形成Holliday中間體結(jié)構(gòu)。( )15、與tRNA相連的氨基酸本身在決定何種氨基酸參入到正在延伸的肽鏈上不起任何作用。( )16、轉(zhuǎn)座重組既可以導(dǎo)致基因的失活,也可以導(dǎo)致基因的激活。( )17、只有用相同的限制性酶獲得的DNA片段末端才能用DNA連接酶連接起來。18、在一個(gè)基因的編碼區(qū)內(nèi)發(fā)生的核苷酸的插入或缺失總是導(dǎo)致移碼突變。19、PCR和末端終止法測序都需要RNA引物。( )20、只有用相同的限制性酶獲得的DNA片段末端才能用DNA連接酶連接起來。21、管家基因在細(xì)胞里始終表達(dá),因此沒有也不需要對其表達(dá)進(jìn)行調(diào)控。( )22、內(nèi)含子在剪接反應(yīng)中被切除,所以一種蛋白質(zhì)的基因如果在內(nèi)含子內(nèi)發(fā)生突變,一般不會影響到這種蛋白質(zhì)的功能。( )23、限制性酶只能切開雙鏈DNA。( )24、RNA病毒因?yàn)闊oDNA基因組,其生活史省去了從DNA到RNA的過程。25、細(xì)菌中弱化子的作用方式是在翻譯水平來控制轉(zhuǎn)錄。( )26、單核苷酸多態(tài)性(SNP)可導(dǎo)致限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)。27、激活蛋白參與正調(diào)控,其濃度越高,激活基因表達(dá)的效果就越好。( )28、CCGG和GGCC序列受同一種限制性酶的識別、切割。( ) 29、如果將細(xì)胞質(zhì)中的mRNA導(dǎo)入到線粒體基質(zhì)內(nèi)翻譯,通常得不到有功能的蛋白質(zhì)產(chǎn)物。( )30、內(nèi)含子大都是遺傳“垃圾”,所以在RNA剪接的時(shí)候不必進(jìn)行精確的切除。31、密碼子第一位堿基發(fā)生的突變要比第三位發(fā)生的突變的危害要大得多。 32、抑制轉(zhuǎn)肽酶活性的抗生素通常與核糖體的大亞基結(jié)合。( )33、根據(jù)擺動(dòng)法則,tRNA上的反密碼子在第三個(gè)位置的核苷酸處于搖擺的位置。34、核糖體大亞基的主要功能是催化肽鍵的形成,而小亞基主要是結(jié)合mRNA和tRNA。( )35、Southern印跡和Northern印跡的主要差別是前者使用特定的DNA分子為探針,后者使用RNA分子為探針。( )36、編碼區(qū)以外的突變不會導(dǎo)致細(xì)胞或生物體表型改變。( )37、T4 DNA連接酶和E.coli連接酶作用時(shí)都需要ATP和NAD+作為輔助因子。( )38、DNA多態(tài)性就是限制性片段長度多態(tài)性。( )二、單項(xiàng)選擇題1、有關(guān)蛋白質(zhì)組不正確的敘述是( C )A、翻譯后加工可導(dǎo)致同一個(gè)翻譯產(chǎn)物形成幾種不同的蛋白質(zhì)B、蛋白質(zhì)之間的相互作用可形成組織特異性蛋白質(zhì)復(fù)合物C、環(huán)境因素對一個(gè)細(xì)胞的蛋白質(zhì)組無影響D、一個(gè)病態(tài)細(xì)胞的蛋白質(zhì)組可能與一個(gè)健康細(xì)胞的蛋白質(zhì)組有所不同2、下列哪項(xiàng)不是原核生物DNA復(fù)制是所必需的 ( C )A. 單鏈結(jié)合蛋白.B DNA聚合酶 C. DNA聚合酶 D.Dna G蛋白 E. ATP3、噬菌體基因組DNA上的堿基發(fā)生糖基化和甲基化修飾的主要功能是( B )A、促進(jìn)基因組DNA整合到宿主基因組上B、保護(hù)病毒DNA不受到限制性酶的水解 C、有利于核酸正確的排列 D、穩(wěn)定DNA,防止突變4、雙螺旋DNA具有的典型特征包括( C )A、沿著一條鏈?zhǔn)谴鬁?,另外一條鏈?zhǔn)切?B、堿基對的排列與螺旋軸平行C、嘌呤堿基和嘧啶堿基的數(shù)目相同 D、螺旋的方向總是右手5、在許多不同物種中,具有高度保守的序列一般是( D )A、假基因 B、特定的間隔序列C、不重要的蛋白質(zhì)的基因 D、非常重要的蛋白質(zhì)的基因6、原核生物DNA復(fù)制不需要( D )A、DNA聚合酶 B、DNA解鏈酶 C、DNA連接酶 D、端粒酶7、大腸桿菌染色體DNA復(fù)制所需要的DNA聚合酶有( D )A、DNA聚合酶 B、DNA聚合酶C、DNA聚合酶 D、DNA聚合酶和8、DNA連接酶需要被連接的兩個(gè)DNA片段分別具有( A )A、3-OH和5- B、5-OH和3-C、3-OH和5-OH D、5-和3-9、端粒酶是一種( C )A、依賴于DNA的DNA聚合酶 B、依賴于DNA的RNA聚合酶C、依賴于RNA的DNA聚合酶 D、依賴于RNA的RNA聚合酶10、細(xì)胞內(nèi)的突變主要發(fā)生在( A )A、DNA復(fù)制 B、DNA修復(fù) C、轉(zhuǎn)錄 D、翻譯11、堿基類似物導(dǎo)致DNA發(fā)生突變的主要原因是( C )A、插入到堿基之間,使DNA發(fā)生斷裂 B、使C變成TC、能夠與不同的堿基配對 D、促進(jìn)DNA的脫嘌呤12、SNP的實(shí)質(zhì)是 ( C )A堿基缺失 B堿基插入 C堿基替換 D移碼突變 E轉(zhuǎn)錄異常13、在正常的生長條件下,某一細(xì)菌基因的啟動(dòng)子的普里布諾框由TCGACT突變成TATACT,由此而引起該基因轉(zhuǎn)錄水平發(fā)生變化,以下正確的是( A )A、該基因的轉(zhuǎn)錄增加 B、該基因的轉(zhuǎn)錄降低C、該基因不能轉(zhuǎn)錄 D、該基因的轉(zhuǎn)錄沒有變化14、如果你想設(shè)計(jì)一種新的抗菌藥物,其作用對象是原核細(xì)胞的RNA聚合酶,那么,你所設(shè)計(jì)的藥物作用的最佳靶點(diǎn)應(yīng)該是( C )A、亞基 B、亞基 C、亞基 D、因子15、真核細(xì)胞的TATA框(B )A、與-35區(qū)一道起作用 B、存在于所有編碼蛋白質(zhì)基因的啟動(dòng)子上C、將RNA聚合酶定位到啟動(dòng)子上 D、存在于-10區(qū)16、原核細(xì)胞內(nèi)受RNA聚合酶全酶濃度的提高而加速的轉(zhuǎn)錄步驟是( B )A、封閉的轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成 B、啟動(dòng)子清空C、轉(zhuǎn)錄延伸 D、轉(zhuǎn)錄終止17、RNA聚合酶和DNA聚合酶所具有的共同性質(zhì)是( C )A、都需要模板和引物 B、都具有自我校對的活性C、都需要Mg2+ D、都能夠?qū)е翫NA發(fā)生解鏈18、以下屬于轉(zhuǎn)錄后基因表達(dá)調(diào)控的機(jī)制是( C )A、DNA分子上的C發(fā)生甲基化修飾 B、轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子結(jié)合C、RNA分子上的C脫氨基轉(zhuǎn)變成U D、基因擴(kuò)增19、大腸桿菌16S rRNA的3端序列是5-CACCUCCUUAOH-3,那么mRNA分子上的SD序列是( D )A、UCCUU B、UCCUCC C、GGAAU D、AGGAGG20、在核糖體上,mRNA的結(jié)合部位和轉(zhuǎn)肽酶的活性中心分別位于( D )A、兩個(gè)亞基之間;大亞基 B、兩個(gè)亞基之間;小亞基C、大亞基;小亞基 D、小亞基;大亞基21、在一個(gè)真核細(xì)胞內(nèi),由一種特定的mRNA翻譯出來的蛋白質(zhì)的量部分取決于( B )A、DNA甲基化的程度 B、mRNA降解的速率C、某些轉(zhuǎn)錄因子的存在 D、mRNA含有的內(nèi)含子的數(shù)目22、已知雙鏈DNA的結(jié)構(gòu)基因中,信息鏈的部分序列是5AGGCTGACC3,其編碼的RNA相應(yīng)序列是 ( D )A. 5AGGCTGACC3 B. 5UCCGACUGG3 C. 5AGGCUGACC3 D. 5GGUCAGCCU3 E. 5CCAGUCGGA323、以下關(guān)于RNAi的敘述中,錯(cuò)誤的是( D )A、可特異性地導(dǎo)致mRNA的降解 B、可特異性地抑制mRNA的翻譯C、只存在于真核生物 D、通常抑制特定mRNA的轉(zhuǎn)錄24、一種典型的限制性酶切割DNA,切點(diǎn)切開后的結(jié)構(gòu)是( C )A、上面一條鏈?zhǔn)?-,下面一條鏈?zhǔn)?-B、上面一條鏈?zhǔn)?-,下面一條鏈?zhǔn)?-C、兩條鏈都是5- D、兩條鏈都是3-25、PCR實(shí)驗(yàn)不需要的成分是( A )A、RNA引物 B、DNA模板C、dNTP D、變性和復(fù)性循環(huán)26、以下用來確定人肝細(xì)胞所有的基因的表達(dá)水平的技術(shù)手段是( C )A、Northern印跡 B、Western印跡 C、基因芯片 D、噬菌體展示6、下列最可能是限制性酶識別位點(diǎn)的堿基序列是( B )A、AGTC B、ACGT C、ATCG D、AACC27、在大腸桿菌中用于表達(dá)外源基因的載體在啟動(dòng)子下游通常含有SD序列,這個(gè)序列的作用是( A )A、為核糖體提供識別位點(diǎn) B、提供轉(zhuǎn)錄位點(diǎn)C、增強(qiáng)啟動(dòng)子活性 D、提高RNA穩(wěn)定性28、原核和真核生物共有的轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列是 ( B )A. poly (A) 信號 B. 啟動(dòng)子 C. 操縱子 D. 終止子 E. 增強(qiáng)子 29. 上游啟動(dòng)子元件是 ( A )A. 一段核酸序列 B. TATA盒的組成部分 C. 位于轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)下游 D. 不一定被轉(zhuǎn)錄 E. 轉(zhuǎn)錄后可以被剪接加工 30. 關(guān)于開放讀框敘述正確的是 ( A )A. 是mRNA的組成部分 B. 內(nèi)部有間隔序列 C. 真核生物的開放讀框往往串聯(lián)在一起 D. 內(nèi)部靠近5 端含有翻譯起始調(diào)控序列 E. 由三聯(lián)體反密碼子連續(xù)排列而成 31. 哪種情況會導(dǎo)致移碼突變 ( C )A. 倒位 B. 顛換 C. 插入一個(gè)堿基 D. 連續(xù)缺失三個(gè)堿基 E. 以上都不對 三、填空1、1在DNA合成中負(fù)責(zé)復(fù)制和修復(fù)的酶是 DNA 聚合酶 。2染色體中參與復(fù)制的活性區(qū)呈Y開結(jié)構(gòu),稱為復(fù)制叉 。3在DNA復(fù)制和修復(fù)過程中,修補(bǔ)DNA螺旋上缺口的酶稱為 DNA聚合酶 在DNA復(fù)制過程中,連續(xù)合成的子鏈稱為前導(dǎo)鏈 ,另一條非連續(xù)合成的子鏈稱為后滯鏈 。4 在 DNA修復(fù)過程中,需要第二種酶, DNA 連接酶 ,作用是將 DNA中相鄰的堿基 連接 起來。 原核生物 DNA聚合酶具有外切核酸酶的活性。有兩種外切核酸酶的活性,它們分別從 5-3 和 3-5降解 DNA。DNA聚合酶 只有 3-5 外切核酸酶活性。5如果DNA聚合酶把一個(gè)不正確的核苷酸加到3端,一個(gè)含35活性的獨(dú)立催化區(qū)會將這個(gè)錯(cuò)配堿基切去。這個(gè)催化區(qū)稱為 校正核酸外切酶 酶。6DNA后隨鏈合成的起始要一段短的 RNA引物 ,它是由 DNA引發(fā)酶 以核糖核苷酸為底物合成的。四 簡答切除修復(fù):通過切除修復(fù)內(nèi)切酶使DNA損傷消除的修復(fù)方法。一般是切去損傷區(qū),然后在DNA聚合酶的作用下以露出的單鏈為模板合成新的互補(bǔ)鏈,最后用連接酶將缺口連接起來。sos修復(fù):SOS修復(fù)是指DNA受到嚴(yán)重?fù)p傷、細(xì)胞處于危急狀態(tài)時(shí)所誘導(dǎo)的一種DNA修復(fù)方式,修復(fù)結(jié)果只是能維持基因組的完整性,提高細(xì)胞的生成率,但留下的錯(cuò)誤較多,故又稱為錯(cuò)誤傾向修復(fù),使細(xì)胞有較高的突變率同源重組:同源重組是指發(fā)生在非姐妹染色單體之間或同一染色體上含有同源序列的DNA分子之間或分子之內(nèi)的重新組合。同源重組反應(yīng)通常根據(jù)交叉分子或Holliday結(jié)構(gòu)的形成和拆分分為三個(gè)階段,即前聯(lián)會體階段、聯(lián)會體形成和Holliday 結(jié)構(gòu)的拆分。位點(diǎn)特異性重組:DNA節(jié)段的相對位置發(fā)生了移動(dòng),從而得到不同的結(jié)果DNA序列發(fā)生重排。位點(diǎn)特異性重組不依賴于DNA順序的同源性(雖然亦可有很短的同源序列),而依賴于能與某些酶相結(jié)合的DNA序列的存在。逆轉(zhuǎn)錄酶:以RNA為模板指導(dǎo)三磷酸脫氧核苷酸合成互補(bǔ)DNA(cDNA)的酶。選擇性剪接:(也叫可變剪接)是指從一個(gè)mRNA前體中通過不同的剪接方式。選擇不同的剪接位點(diǎn)組合產(chǎn)生不同的mRNA剪接異構(gòu)體的過程,而最終的蛋白產(chǎn)物會表現(xiàn)出不同或者是相互拮抗的功能和結(jié)構(gòu)特性,或者,在相同的細(xì)胞中由于表達(dá)水平的不同而導(dǎo)致不同的表型。RNA 編輯:在mRNA水平上改變遺傳信息的過程。具體說來,指基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA分子中,由于核苷酸的缺失,插入或置換,基因轉(zhuǎn)錄物的序列不與基因編碼序列互補(bǔ),使翻譯生成的蛋白質(zhì)的氨基酸組成,不同于基因序列中的編碼信息現(xiàn)象。開放閱讀框:是結(jié)構(gòu)基因的正常核苷酸序列,從起始密碼子到終止密碼子的閱讀框可編碼完整的多肽鏈,其間不存在使翻譯中斷的終止密碼子。SD 序列:mRNA中用于結(jié)合原核生物核糖體的序列。分子伴侶:細(xì)胞核內(nèi)能與組蛋白結(jié)合并能介導(dǎo)核小體有序組裝的核質(zhì)素。廣泛存在于原核生物和真核生物的一類保守蛋白,分布于細(xì)胞的各個(gè)區(qū)域。衰減子:是位于細(xì)菌操縱子上游的一段核苷酸序列。原核生物中通過翻譯前導(dǎo)肽而實(shí)現(xiàn)控制DNA的轉(zhuǎn)錄的調(diào)控方式稱衰減作用。RNA 干擾:在進(jìn)化過程中高度保守的、由雙鏈RNA誘發(fā)的、同源mRNA高效特異性降解的現(xiàn)象。增色效應(yīng):由于DNA變性引起的光吸收增加,也就是變性后DNA 溶液的紫外吸收作用增強(qiáng)的效應(yīng)。減色效應(yīng):若變性DNA復(fù)性形成雙螺旋結(jié)構(gòu)后,其260nm紫外吸收會降低,這種現(xiàn)象叫減色效應(yīng)限制性核酸內(nèi)切酶:是可以識別DNA的特異序列,并在識別位點(diǎn)或其周圍切割雙鏈DNA的一類內(nèi)切酶,簡稱限制酶。啟動(dòng)子:是基因(gene)的一個(gè)組成部分,控制基因表達(dá)(轉(zhuǎn)錄)的起始時(shí)間和表達(dá)的程度。終止子:是給予RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄終止信號的DNA序列Southern 雜交、Northern雜交、FISH 、Western雜交區(qū)別Southern 雜交(637):利用標(biāo)記的核酸做探針,與轉(zhuǎn)化細(xì)胞的DNA進(jìn)行雜交,直接篩選和鑒定目的序列克隆Northern雜交(637):利用標(biāo)記的核酸做探針,與轉(zhuǎn)化細(xì)胞的RNA進(jìn)行雜交,直接篩選和鑒定目的序列克隆FISH:熒光標(biāo)記的原位雜交技術(shù),一種用能和染色體特定序列高度特異性結(jié)合的熒光標(biāo)記的探針來鑒定和定位染色體上特定DNA序列的存在或缺失Western雜交: 利用標(biāo)記的抗體和特定目標(biāo)蛋白結(jié)合以檢測組織勻漿樣本或提取物樣本中特定蛋的一種技術(shù)蛋白質(zhì)糖基化類型與功能一,類型:N-糖基化,O-糖基化二,功能:(火把一定分解)1.活性必需 介導(dǎo)某些蛋白質(zhì)的生物活性起直接作用(HCG)2.靶向轉(zhuǎn)運(yùn) 幫助目的蛋白到達(dá)其功能場所(溶酶體酶轉(zhuǎn)運(yùn))3.分子識別 直接參與配體-受體識別,底物-酶結(jié)合(某些細(xì)胞因子受體與細(xì)胞因子的識別)4.結(jié)構(gòu)穩(wěn)定 寡糖有助于穩(wěn)定蛋白質(zhì)構(gòu)象,保護(hù)其免受蛋白酶攻擊,延長壽命。5.易于溶解 增強(qiáng)蛋白質(zhì)的水溶性6.定向嵌膜 避免膜蛋白在轉(zhuǎn)運(yùn)和發(fā)揮作用時(shí)翻轉(zhuǎn)蛋白質(zhì)泛素化的生理意義:在蛋白質(zhì)的定位、代謝、功能、調(diào)節(jié)和降解中都起著十分重要的作用.參與細(xì)胞周期、增殖、凋亡、分化、轉(zhuǎn)移、基因表達(dá)、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)、信號傳遞、損傷修復(fù)、炎癥免疫等幾乎一切生命活動(dòng)的調(diào)控.通過泛素化的修飾能使一些生命過程中起決定作用的酶特定識別要作用的蛋白質(zhì)以發(fā)生作用,意義重大.原核基因表達(dá)在翻譯水平上的調(diào)控機(jī)制:(SM飯飯盒飯)1、 SD序列(核糖體結(jié)合位點(diǎn))的影響2、 mRNA的穩(wěn)定性3、 翻譯阻遏4、 反義RNA5、 核糖開關(guān)6、 翻譯移碼真核細(xì)胞翻譯水平的調(diào)控方式有哪些:(是M小框林干)(1) 對翻譯起始的調(diào)控,包括阻遏蛋白的調(diào)控、翻譯起始因子(IF)的功能調(diào)控、起始密碼子及上游5-UTR和下游3-UTR對翻譯的調(diào)控;(2) mRNA穩(wěn)定性與翻譯控制;(3) 小分子RNA對翻譯的影響。(4) 上游開放閱讀框(5) 翻譯起始因子,核糖體蛋白磷酸化(6) RNA干擾五 綜述就本學(xué)期自己所學(xué)知識,談?wù)劮肿由飳W(xué)在中醫(yī)中藥研究中的應(yīng)用分子生物學(xué)是從分子水平來研究生命現(xiàn)象的一門基礎(chǔ)學(xué)科.把分子生物學(xué)的新技術(shù)引入到中醫(yī)藥研究中 ,不僅為闡釋中醫(yī)藥理論、加深對疾病本質(zhì)的認(rèn)識、探討中藥的作用機(jī)理和研制新藥提供了一種新的研究工具和手段 ,而且還將啟迪新的思想和發(fā)展新的診療技術(shù) ,并將對中醫(yī)藥學(xué)的變革和進(jìn)步起到巨大的推動(dòng)作用.Sextama盒:原核生物啟動(dòng)子上-35bp處的TTGACA區(qū),又稱-35區(qū)。RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄起始的識別序列。Probnow盒:原核生物中,在啟動(dòng)子上游有一個(gè)由5-6個(gè)核苷酸組成的共有序列位于起點(diǎn)上游10bp處,所以又稱10序列,是轉(zhuǎn)錄的解旋功能部位,具有高度保守性和一致性。TATA盒:是構(gòu)成真核生物啟動(dòng)子的元件之一。其一致順序?yàn)門ATAATAAT(非模板鏈序列)。它約在多數(shù)真核生物基因轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游約-30bp(-25-32bp)處,基本上由A-T堿基對組成,是決定基因轉(zhuǎn)錄始的選擇,為RNA聚合酶的結(jié)合處之一,RNA聚合酶與TATA框牢固結(jié)合之后才能開始轉(zhuǎn)錄。共翻譯轉(zhuǎn)運(yùn):內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的膜結(jié)合核糖體在合成蛋白質(zhì)時(shí),由于蛋白質(zhì)N端的信號序列的作用,使得在多肽鏈合成完成之前就在進(jìn)行轉(zhuǎn)運(yùn)。翻譯后轉(zhuǎn)運(yùn):合成的蛋白質(zhì)穿過生物膜的轉(zhuǎn)移。游離核糖體上合成的蛋白質(zhì)必須等蛋白質(zhì)完全合成并釋放到胞質(zhì)溶膠后才能被轉(zhuǎn)運(yùn),所以將這種轉(zhuǎn)運(yùn)方式稱為翻譯后轉(zhuǎn)運(yùn)。順式作用原件:存在于基因旁側(cè)序列中能影響基因表達(dá)的序列。順式作用元件包括啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、調(diào)控序列和可誘導(dǎo)元件等,它們的作用是參與基因表達(dá)的調(diào)控。:反式作用因子:是指能直接或間接地識別或結(jié)合在各類順式作用元件核心序列上參與調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄效率的蛋白質(zhì)。多為轉(zhuǎn)錄因子正調(diào)控:當(dāng)阻遏蛋白從操縱基因上脫離后,激活蛋白與啟動(dòng)子結(jié)合以及和RNA聚合酶的相互作用,幫助結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄起始,促進(jìn)相應(yīng)蛋白的合成。負(fù)調(diào)控:是指 阻遏蛋白與操縱基因的結(jié)合,阻止了RNA聚合酶對操縱子結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄。鋅指結(jié)構(gòu):一種常出現(xiàn)在DNA結(jié)合蛋白中的一種結(jié)構(gòu)基元。是由一個(gè)含有大約30個(gè)氨基酸的環(huán)和一個(gè)與環(huán)上的4個(gè)Cys或2個(gè)Cys和2個(gè)His配位的Zn2+構(gòu)成,形成的結(jié)構(gòu)像手指狀。亮氨酸拉鏈:出現(xiàn)在DNA結(jié)合蛋白質(zhì)和其它蛋白質(zhì)中的一種結(jié)構(gòu)基元,即模體。當(dāng)來自同一個(gè)或不同多肽鏈的兩個(gè)兩用性的-螺旋的疏水面相互作用形成一個(gè)圈對圈的二聚體結(jié)構(gòu)時(shí)就形成了亮氨酸拉鏈。原位PCR:在組織細(xì)胞里進(jìn)行PCR反應(yīng),它結(jié)合了具有細(xì)胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術(shù)的優(yōu)點(diǎn),是細(xì)胞學(xué)科研與臨床診斷領(lǐng)域里的一項(xiàng)有較大潛力的新技術(shù)。多重PCR:又稱多重引物PCR或復(fù)合PCR,它是在同一PCR反應(yīng)體系里加上二對以上引物,同時(shí)擴(kuò)增出多個(gè)核酸片段的PCR反應(yīng),其反應(yīng)原理,反應(yīng)試劑和操作過程與一般PCR相同。 PCRRFLP:RFLP是指基因型之間限制性片段長度的差異,這種差異是由限制性酶切位點(diǎn)上堿基的插入、缺失、重排或點(diǎn)突變所引起的。PCR-SSCP:指單鏈構(gòu)象多態(tài)性檢測是一種基于DNA構(gòu)象差別來檢測點(diǎn)突變的方法。定量PCR:是指用外標(biāo)法(熒光雜交探針保證特異性)通過監(jiān)測PCR過程(監(jiān)測擴(kuò)增效率)達(dá)到精確定量起始模板數(shù)的目的,同時(shí)以內(nèi)對照有效排除假陰性結(jié)果(擴(kuò)增效率為零)。逆轉(zhuǎn)錄PCR:是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的一種廣泛應(yīng)用的變形。在RT-PCR中,一條RNA鏈被逆轉(zhuǎn)錄成為互補(bǔ)DNA,再以此為模板通過PCR進(jìn)行DNA擴(kuò)增。 真核細(xì)胞染色質(zhì)水平調(diào)控的方式有哪些 61. 染色質(zhì)活化2. 染色質(zhì)缺失3. 基因擴(kuò)增4. 基因重排5. 基因組印記6. 組蛋白修飾和DNA的甲基化簡述基因診斷常用的方法技術(shù)(和PD雞心)核酸雜交 是從核酸分子混合液中檢測特定大小的核酸分子的傳統(tǒng)方法。PCR技術(shù) 擴(kuò)增微量核酸,用于檢測已知序列或已知部分序列的基因,簡便快捷,成本低廉。DNA測序 目前在實(shí)驗(yàn)室手工測序常用Sanger雙脫氧鏈終止法?;蛐酒夹g(shù) 基因芯片技術(shù)是近年來發(fā)展十分迅速的大規(guī)模、高通量分子檢測技術(shù)。其基本原理是核酸雜交,其基本過程是將許多特定的寡核苷酸片段或基因片段作為探針,有規(guī)律的排列固定于支持物上,形成矩陣點(diǎn)。PCR原理該技術(shù)是在模板DNA、引物和四種脫氧核糖核苷酸存在下,依賴于DNA聚合酶的酶促合成反應(yīng)。DNA聚合酶以單鏈DNA為模板,借助一小段雙鏈DNA來啟動(dòng)合成,通過一個(gè)或兩個(gè)人工合成的寡核苷酸引物與單鏈DNA模板中的一段互補(bǔ)序列結(jié)合,形成部分雙鏈。在適宜的溫度和環(huán)境下,DNA聚合酶將脫氧單核苷酸加到引物3-OH末端,并以此為起始點(diǎn),沿模板53方向延伸,合成一條新的DNA互補(bǔ)鏈。

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