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1、專題專題2 2 細胞工程細胞工程 19961996年年7 7月月5 5日日, ,世界上第一只體細胞克隆世界上第一只體細胞克隆動物動物-克隆羊克隆羊多利多利誕生于英國誕生于英國. .這樣的生物技術(shù)屬于何種生物工程?這樣的生物技術(shù)屬于何種生物工程?細胞工程細胞工程 細胞工程是指應(yīng)用細胞生物學(xué)和分子細胞工程是指應(yīng)用細胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的原理和方法,通過生物學(xué)的原理和方法,通過細胞水平細胞水平或或細細胞器水平胞器水平上的操作,按照人們的意愿來上的操作,按照人們的意愿來改改變變細胞內(nèi)細胞內(nèi)的的遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)或或獲得細胞產(chǎn)品獲得細胞產(chǎn)品的一的一門綜合科學(xué)技術(shù)。門綜合科學(xué)技術(shù)。什么叫細胞工程?什么叫細胞
2、工程?2.1植物細胞工程植物細胞工程2.1.1植物細胞工程的基本技術(shù)植物細胞工程的基本技術(shù)利用菊花花瓣培養(yǎng)的菊花利用菊花花瓣培養(yǎng)的菊花為什么植物的一個花瓣就可以培育出完整的植株呢?為什么植物的一個花瓣就可以培育出完整的植株呢? 一一 細胞的全能性細胞的全能性1 1什么是細胞的全能性?什么是細胞的全能性?2 2為什么細胞具有全能性?為什么細胞具有全能性?3 3菊花體內(nèi)的細胞為什么沒有表現(xiàn)出全能性,而是分化成菊花體內(nèi)的細胞為什么沒有表現(xiàn)出全能性,而是分化成不同的組織器官?不同的組織器官?4.4.所有細胞的全能性都一樣嗎?所有細胞的全能性都一樣嗎?一一 細胞的全能性細胞的全能性1 1、概念、概念:生
3、物體的細胞具有使后代細胞發(fā)生物體的細胞具有使后代細胞發(fā)育成完整個體的潛能的特性。育成完整個體的潛能的特性。 2 2、原因、原因:生物體的每一個細胞都含本物種生物體的每一個細胞都含本物種的的全套遺傳物質(zhì)全套遺傳物質(zhì),都有發(fā)育成完整,都有發(fā)育成完整個體的個體的全套基因全套基因。 3 、在生物體內(nèi),由于在生物體內(nèi),由于基因的選擇性表基因的選擇性表 達達,細胞不能表現(xiàn)出全能性,而是分化成,細胞不能表現(xiàn)出全能性,而是分化成為不同的組織器官。為不同的組織器官。1 1)受精卵)受精卵生殖細胞生殖細胞體細胞體細胞* *4 4、全能性的比較全能性的比較2 2)植物細胞全能性一般比動物細胞強)植物細胞全能性一般比
4、動物細胞強利用菊花花瓣培養(yǎng)的菊花利用菊花花瓣培養(yǎng)的菊花植物的花瓣是怎樣長成一株完整植株的呢?植物的花瓣是怎樣長成一株完整植株的呢? 菊花菊花花瓣花瓣愈傷愈傷組織組織根、芽根、芽植物體植物體脫分化脫分化再分化由高度分化的植物器官、由高度分化的植物器官、組織或細胞產(chǎn)生愈傷組組織或細胞產(chǎn)生愈傷組織的過程織的過程愈傷組織重新分愈傷組織重新分化成根或芽等器化成根或芽等器官的過程官的過程離體的植物器官、組織或細胞,離體的植物器官、組織或細胞,在培養(yǎng)一段間以后,通過細胞分在培養(yǎng)一段間以后,通過細胞分裂,形成一種高度液泡化無定形裂,形成一種高度液泡化無定形狀態(tài)薄壁細胞組成的排列疏松無狀態(tài)薄壁細胞組成的排列疏松
5、無規(guī)則的組織。規(guī)則的組織。 要把一塊組織通過培養(yǎng)得到一株完整植株, 應(yīng)該如何操作呢?切取切取形成層形成層無菌無菌接種接種誘導(dǎo)愈傷織誘導(dǎo)愈傷織的形成的形成試管苗的形成試管苗的形成培養(yǎng)室培養(yǎng)室移栽移栽脫分化脫分化再分化再分化1. 1.植物細胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是植物細胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是什么?什么?2.2.在植物組織培養(yǎng)過程中,為什么要在植物組織培養(yǎng)過程中,為什么要進行一系列的消毒,滅菌,并且要求進行一系列的消毒,滅菌,并且要求無菌操作?無菌操作?離體、一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激離體、一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件素和其他外界條件避免雜菌在上面迅速生長而避免雜菌在上面迅速生長而危害培養(yǎng)物的生
6、長。危害培養(yǎng)物的生長。想一想想一想離體的植物器官、組織或細胞離體的植物器官、組織或細胞愈傷組織愈傷組織根、芽根、芽植物體植物體外植體外植體脫分化脫分化植物激素:植物激素:細胞分裂素、生長素細胞分裂素、生長素再分化再分化2、過程、過程 植物組織培養(yǎng)就是在植物組織培養(yǎng)就是在無菌無菌和和人工控制人工控制條件下,將條件下,將離體離體的植物器官、組織、細的植物器官、組織、細胞,培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,給予胞,培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,給予適宜的培養(yǎng)條件適宜的培養(yǎng)條件,誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、,誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽,最終形成完整的植株。叢芽,最終形成完整的植株。二、植物組織培養(yǎng)二、植物組織培養(yǎng)1 1、概
7、念、概念1、若用、若用“ ” 表示植物組織培養(yǎng)的過程。請回答:表示植物組織培養(yǎng)的過程。請回答: (1) 表示表示 , 能被培養(yǎng)成為能被培養(yǎng)成為的根本原因是的根本原因是(2) 表示表示 , 脫分化脫分化再分化再分化二、植物體細胞雜交技術(shù)二、植物體細胞雜交技術(shù)番茄番茄馬鈴薯馬鈴薯不能。不能。 因為不同種生物之間存因為不同種生物之間存在著在著生殖隔離生殖隔離,所以用,所以用傳統(tǒng)的有性雜交方法是傳統(tǒng)的有性雜交方法是不可能做到這一點的。不可能做到這一點的。于是,科學(xué)家試圖用這兩種植物的體細胞于是,科學(xué)家試圖用這兩種植物的體細胞進行雜交,來實現(xiàn)這一美妙的設(shè)想。進行雜交,來實現(xiàn)這一美妙的設(shè)想。二、植物體細胞
8、雜交技術(shù)二、植物體細胞雜交技術(shù)這幅番茄這幅番茄馬鈴薯圖利馬鈴薯圖利用傳統(tǒng)有性雜交方法能用傳統(tǒng)有性雜交方法能實現(xiàn)嗎?為什么?實現(xiàn)嗎?為什么?理想圖理想圖 將將不同種的不同種的植物植物體細胞體細胞,在一定條,在一定條件下件下融合成雜種細胞融合成雜種細胞,并把雜種細胞培,并把雜種細胞培育成育成新的植物體新的植物體的技術(shù)。的技術(shù)。1 1、概念、概念 1 1你認(rèn)為兩個來自不同植物的體細胞完成融合,遇到的你認(rèn)為兩個來自不同植物的體細胞完成融合,遇到的第一個障礙是什么?第一個障礙是什么? 2 2有沒有一種溫和的去壁方法呢?有沒有一種溫和的去壁方法呢? 3 3為什么兩個原生質(zhì)體能發(fā)生融合,這與細胞膜的什么為什
9、么兩個原生質(zhì)體能發(fā)生融合,這與細胞膜的什么特性有關(guān)?特性有關(guān)? 4 4如果兩個來源不同的原生質(zhì)體發(fā)生了融合,下一步該如果兩個來源不同的原生質(zhì)體發(fā)生了融合,下一步該做何處理?做何處理? 5 5如何將雜種細胞培育成雜種植株?如何將雜種細胞培育成雜種植株?請思考:請思考:植物細胞植物細胞A A植物細胞植物細胞B B原生質(zhì)體原生質(zhì)體A A原生質(zhì)體原生質(zhì)體B B原生質(zhì)體融合正在融合的正在融合的原生質(zhì)體原生質(zhì)體再生出細胞壁雜種細胞雜種細胞愈傷組織愈傷組織雜種植株雜種植株去細胞壁纖維素酶纖維素酶果膠酶果膠酶物理方法物理方法化學(xué)方法:化學(xué)方法:離心離心振動振動電刺激電刺激聚乙二醇聚乙二醇細胞分裂植物組織培養(yǎng)植
10、物細胞融合植物細胞融合酶解法人工誘導(dǎo)方法2 2、過過程程雜雜種種植植株株融合的融合的原生質(zhì)原生質(zhì)體體ABAB再再生生出出細細胞胞壁壁脫脫分分化化愈愈傷傷組組織織再再分分化化過程過程植物細胞的融合植物細胞的融合植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物細胞植物細胞A原生質(zhì)體原生質(zhì)體B原生質(zhì)體原生質(zhì)體A雜種雜種細胞細胞AB去去 壁壁去去 壁壁人人工工誘誘導(dǎo)導(dǎo)方法?方法?促進融合促進融合的方法?的方法?融合融合完成完成的的標(biāo)志標(biāo)志植物細胞植物細胞B二、植物體細胞雜交技術(shù)二、植物體細胞雜交技術(shù)利用電激發(fā)將野生馬鈴薯與栽培馬鈴薯進行細胞融合利用電激發(fā)將野生馬鈴薯與栽培馬鈴薯進行細胞融合3、意義克服不同生物遠緣雜交的障
11、礙,克服不同生物遠緣雜交的障礙,出現(xiàn)自然界沒有的新品種出現(xiàn)自然界沒有的新品種。4.4.未解決的問題:未解決的問題:未能讓雜種植物按照人們未能讓雜種植物按照人們的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)良。的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)良。為什么為什么“番茄番茄馬鈴薯馬鈴薯”超級雜種植株沒有如超級雜種植株沒有如科學(xué)家所想像的那樣,地上長番茄、地下結(jié)馬科學(xué)家所想像的那樣,地上長番茄、地下結(jié)馬鈴薯?鈴薯? 主要原因是:主要原因是:生物基因的表達不是孤立的,它生物基因的表達不是孤立的,它們之間是相互調(diào)控、相互影響的,們之間是相互調(diào)控、相互影響的,馬鈴薯馬鈴薯番茄雜番茄雜交植株的細胞中雖然具備兩個物種的遺傳物質(zhì),但交植株的細胞中雖然具
12、備兩個物種的遺傳物質(zhì),但這些遺傳物質(zhì)的表達受到相互干擾,不能再像馬鈴這些遺傳物質(zhì)的表達受到相互干擾,不能再像馬鈴薯或番茄植株中的遺傳物質(zhì)一樣有序表達,所以雜薯或番茄植株中的遺傳物質(zhì)一樣有序表達,所以雜交植株不能地上長番茄、地下結(jié)馬鈴薯。交植株不能地上長番茄、地下結(jié)馬鈴薯。植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物體細胞雜交技術(shù)植物體細胞雜交技術(shù)所屬所屬范疇范疇原理原理步驟步驟意義意義聯(lián)系聯(lián)系無性繁殖無性繁殖細胞全能性細胞全能性脫分化脫分化再分化再分化保持優(yōu)良性狀保持優(yōu)良性狀繁殖速度快、大規(guī)模生產(chǎn)繁殖速度快、大規(guī)模生產(chǎn)提高經(jīng)濟效益提高經(jīng)濟效益雜交技術(shù)應(yīng)用了組織培養(yǎng)雜交技術(shù)應(yīng)用了組織培養(yǎng)克服不同種生物遠源雜交克
13、服不同種生物遠源雜交的障礙的障礙去除細胞壁去除細胞壁融合形成雜種細胞融合形成雜種細胞組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)膜流動性膜流動性細胞全能性細胞全能性染色體變異、基因重組染色體變異、基因重組1 1、不能人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法、不能人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法是(是( )A A、振動、振動 B B、電刺激、電刺激C C、PEGPEG試劑試劑 D D、重壓、重壓2 2、植物細胞融合完成的標(biāo)志的是(、植物細胞融合完成的標(biāo)志的是( )A A、產(chǎn)生新的細胞壁、產(chǎn)生新的細胞壁 B B、細胞膜發(fā)生融合、細胞膜發(fā)生融合C C、細胞質(zhì)發(fā)生融合、細胞質(zhì)發(fā)生融合 D D、細胞核發(fā)生融合、細胞核發(fā)生融合A AD D1、下列有關(guān)細
14、胞全能性的含義,正確的是:、下列有關(guān)細胞全能性的含義,正確的是:( )A、每個生物體內(nèi)的所有細胞都具有相同的功能、每個生物體內(nèi)的所有細胞都具有相同的功能 B、生物體內(nèi)的任何一個細胞可以完成該個體的全、生物體內(nèi)的任何一個細胞可以完成該個體的全部功能部功能 C、生物體的每一個活細胞都具有發(fā)育成完整個體、生物體的每一個活細胞都具有發(fā)育成完整個體的潛能的潛能 D、 生物體的每個細胞都經(jīng)過產(chǎn)生、分裂、分化、生物體的每個細胞都經(jīng)過產(chǎn)生、分裂、分化、生長、衰老、死亡的全過程生長、衰老、死亡的全過程 C 2、有關(guān)全能性的表述中,不正確的是(、有關(guān)全能性的表述中,不正確的是( ) 受精卵在自然條件下能使后代細胞
15、形成完受精卵在自然條件下能使后代細胞形成完 整個體,因此全能性最高整個體,因此全能性最高 生物體內(nèi)細胞由于分化全能性不能表達生物體內(nèi)細胞由于分化全能性不能表達 卵細胞和受精卵一樣,細胞未分化,全能卵細胞和受精卵一樣,細胞未分化,全能 性很高性很高 植物細胞離體培養(yǎng)在一定條件下能表現(xiàn)出植物細胞離體培養(yǎng)在一定條件下能表現(xiàn)出 全能性全能性C3.在離體的植物器官、組織或細胞脫在離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織的過程中,下列分化形成愈傷組織的過程中,下列哪一項條件是不需要的(哪一項條件是不需要的( )A.消毒滅菌消毒滅菌B.適宜的溫度適宜的溫度C.充足的光照充足的光照D.適宜的養(yǎng)料和激素適宜的養(yǎng)料和激素C4.要將胡蘿卜韌皮部細胞培養(yǎng)成完要將胡蘿卜韌皮部細胞培養(yǎng)成完整植株,不需要(整植株,不需要( )A.具有完整細胞核的細胞具有完整細胞核的細胞B.離體狀態(tài)離體狀態(tài)C.導(dǎo)入外源基因?qū)胪庠椿駾.一定的營養(yǎng)物質(zhì)和激素一定的營養(yǎng)物質(zhì)和激素C謝謝!謝謝!