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1、高中生物《蛋白質(zhì)的鑒定》課堂實(shí)驗(yàn)的教案
一、教學(xué)目的
初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法
二、教學(xué)建議
教材中本實(shí)驗(yàn)安排為驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)有條件的學(xué)??梢愿臑樘剿餍?
實(shí)驗(yàn)安排在講課之前或與講課同步進(jìn)行
本實(shí)驗(yàn)難度并不大但內(nèi)容較多實(shí)驗(yàn)時(shí)間較長(zhǎng)因此必須作周密安
排才能按時(shí)完成實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意以下幾點(diǎn)
1. 增設(shè)教師演示實(shí)驗(yàn)上課之前教師應(yīng)該準(zhǔn)備好做演示實(shí)驗(yàn)所需
的實(shí)驗(yàn)材料、用具、儀器和試劑等同時(shí)逐項(xiàng)完成還原糖、脂肪、蛋白
質(zhì)3類有機(jī)物的鑒定實(shí)驗(yàn)在實(shí)驗(yàn)課上將3個(gè)實(shí)驗(yàn)的正確結(jié)果分別展示
在講臺(tái)上并作扼要的介紹以便使學(xué)生將自己的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與教師的演
示實(shí)驗(yàn)作比較
2. 實(shí)驗(yàn)
2、中學(xué)生應(yīng)分工合作在“還原糖的鑒定”實(shí)驗(yàn)中當(dāng)每組兩
個(gè)學(xué)生中的一個(gè)制備生物組織樣液時(shí)另一個(gè)學(xué)生可以用酒精燈將水
煮開以便縮短實(shí)驗(yàn)的等待時(shí)間在“脂肪的鑒定”實(shí)驗(yàn)中一個(gè)學(xué)生制作
臨時(shí)裝片時(shí)另一個(gè)學(xué)生則可以調(diào)試顯微鏡另外在完成前兩個(gè)實(shí)驗(yàn)時(shí)
一個(gè)學(xué)生洗刷試管、清洗玻片和整理顯微鏡另一個(gè)學(xué)生則可以進(jìn)行后
一個(gè)實(shí)驗(yàn)的操作
3. 關(guān)于鑒定還原糖的實(shí)驗(yàn)在加熱試管中的溶液時(shí)應(yīng)該用試管夾夾住試管上部并放入盛開水的大燒杯中加熱注意試管底部不要接觸
燒杯底部同時(shí)試管口不要朝向?qū)嶒?yàn)者以免試管內(nèi)溶液沸騰時(shí)沖出試
管造成燙傷如果試管內(nèi)溶液過(guò)于沸騰可以上提試管夾使試管底部離開大燒杯中的開水
4. 做鑒定還原糖
3、和蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)時(shí)在鑒定之前可以留出一部分
樣液以便與鑒定后的樣液的顏色變化作對(duì)比這樣可以增強(qiáng)說(shuō)服力
5. 斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用切勿將甲液和乙
液分別加入組織樣液中
三、參考資料
還原糖的鑒定原理生物組織中普遍存在的還原糖種類較多常見(jiàn)
的有葡萄糖、果糖、麥芽糖它們的分子內(nèi)都含有還原性基團(tuán)(游離醛
基或游離酮基)因此叫做還原糖蔗糖的分子內(nèi)沒(méi)有游離的半縮醛羥基
因此叫做非還原性糖不具有還原性本實(shí)驗(yàn)中用斐林試劑只能檢驗(yàn)生
物組織中還原糖存在與否而不能鑒定非還原性糖
斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度
為0.05g/mL的硫酸銅溶液配制而成
4、二者混合后立即生成淡藍(lán)色的
Cu(OH)2沉淀Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下能夠生成石專紅
色的Cu2的淀而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸具反應(yīng)式如下:
CH2OH—(CHOH*CHO2Cu(OH)2^CH2OH(CHOH)4-COOH
Cu2a+2H2O
用斐林試劑鑒定還原糖時(shí)溶液的顏色變化過(guò)程為:淺藍(lán)色棕色
磚紅色(沉淀)
蛋白質(zhì)的鑒定原理鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時(shí)常用雙縮
脲法使用的是雙縮脲試劑雙縮脲試劑的成分是質(zhì)量濃度為0.1g/mL
的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.01g/mL的硫酸銅溶液在堿性溶液
(NaOH沖雙縮月尿(H2NO6NH-CONH跳與Cu
5、2+乍用形成紫色或紫紅
色的絡(luò)合物這個(gè)反應(yīng)叫做雙縮脲反應(yīng)由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與
雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵因此蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)
用于鑒定還原糖的實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備植物組織是常用的實(shí)驗(yàn)材料但
必須加以選擇在雙子葉植物中光合作用的主要產(chǎn)物葡萄糖形成后合
成為淀粉暫時(shí)儲(chǔ)藏在葉子內(nèi)因此最好不用雙子葉植物的葉子作實(shí)驗(yàn)
材料有些單子葉植物如韭菜、鳶尾并不將光合作用的初始產(chǎn)物轉(zhuǎn)變?yōu)?
淀粉因此葉內(nèi)含有大量的可溶性單糖但是由于葉片中葉綠素的顏色
較深對(duì)于鑒定時(shí)的顏色反應(yīng)起著掩蓋作用導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象不明顯因此
也不宜用單子葉植物的葉子作實(shí)驗(yàn)材料
本實(shí)驗(yàn)最理想的實(shí)驗(yàn)材料是還原糖含量較高的植物
6、組織(或器
官)而且組織的顏色較淺或近于白色的如蘋果和梨的果實(shí)經(jīng)試驗(yàn)比較
顏色反應(yīng)的明顯程度依次為蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜
用于鑒定脂肪的實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材料最好選擇富含脂肪的種
子如花生種子(取其子葉)供實(shí)驗(yàn)用的花生種子必須提前浸泡3?4h
浸泡時(shí)間短了不容易切成片;浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)則組織太軟切下的薄片不
易成形
做鑒定脂肪的實(shí)驗(yàn)教師可根據(jù)本地區(qū)的情況選用蘇丹m或蘇丹
IV染液蘇丹m染液遇脂肪的顏色反應(yīng)為橘黃色蘇丹IV染液遇脂肪的
顏色反應(yīng)為紅色因蘇丹IV染液與脂肪的親和力比較強(qiáng)所以染色的時(shí)
間應(yīng)比較短一般為1min左右用于鑒定蛋白質(zhì)的實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材
料最好選用富含
7、蛋白質(zhì)的生物組織(或器官)植物材料常用的是大豆
種子動(dòng)物材料常用的是雞蛋(卵白)如用大豆種子必須提前浸泡1?2d
這樣容易研磨成漿有條件的學(xué)??梢灾苯硬捎矛F(xiàn)成的大豆磨成的豆
漿豆?jié){可以購(gòu)買也可用小型的研磨機(jī)制取利用豆?jié){作實(shí)驗(yàn)材料可以
節(jié)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間
如果用稀釋的卵白作實(shí)驗(yàn)材料效果會(huì)更好
斐林試劑的配制
甲液質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液
乙液質(zhì)量濃度為0.05g/mL的硫酸銅溶液
使用時(shí)臨時(shí)配制將4?5滴乙液滴入2mL甲液中配完后立即使用
蘇丹田溶液的配制稱取0.1g蘇丹加干粉溶于100mL#積分?jǐn)?shù)為
95%的酒精中待全部溶解后再使用
蘇丹IV溶液的配制稱取0.1g蘇丹IV干粉溶于50mL丙酮中再加
入體積分?jǐn)?shù)為70%勺酒精50mL充分混合后即可使用
雙縮脲試劑的配制取10g氫氧化鈉放入容量瓶(或有刻度的燒
杯)中加水至100mL寺充分溶解后倒入試劑并K中配成質(zhì)量濃度為0.1g
/mL的氫氧化鈉溶液瓶口塞上月塞貼上標(biāo)簽寫上試劑A
取1g硫酸銅放入容量瓶(或有刻度的燒杯)中加水至100mL待
充分溶解后倒入試劑瓶中配成質(zhì)量濃度為0.01g/mL的硫酸銅溶液
(藍(lán)色)瓶口塞上膠塞貼上標(biāo)簽寫上試劑B