《高二生物選修1 第三課時(shí) 純化大腸桿菌 ppt》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《高二生物選修1 第三課時(shí) 純化大腸桿菌 ppt（24頁珍藏版）》請?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。
1、專題專題2 :2 :微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用淮北市天一中學(xué)生物組 李偉三、三、實(shí)驗(yàn)操作實(shí)驗(yàn)操作 （一）制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（一）制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（用于培養(yǎng)細(xì)菌用于培養(yǎng)細(xì)菌）1 1計(jì)算、稱量計(jì)算、稱量操作步驟操作步驟2溶化溶化 3調(diào)調(diào)pH：pH76 4過濾：這一步可以省去。過濾：這一步可以省去。 5加塞加塞 6包扎包扎 7 7滅菌滅菌: : 高壓蒸氣滅菌 8 8倒平板倒平板: : 待培養(yǎng)基冷卻到待培養(yǎng)基冷卻到50 50 左右時(shí)，在酒精燈附左右時(shí)，在酒精燈附近倒平板。（倒平板操作見課本）近倒平板。（倒平板操作見課本）2d2d后觀察平后觀察平板，無雜菌污染才可用來接種板，無雜菌污
2、染才可用來接種. . 9 9無菌檢查：無菌檢查： 將滅菌的培養(yǎng)基放入將滅菌的培養(yǎng)基放入3737的溫室中培的溫室中培養(yǎng)養(yǎng)24482448小時(shí)，以檢查滅菌是否徹底。小時(shí)，以檢查滅菌是否徹底。（二）純化大腸桿菌（二）純化大腸桿菌接種方法有：平板劃線法稀釋涂布平板法平板劃線的操作平板劃線的操作一旦劃破，會(huì)造成劃線不均勻，難一旦劃破，會(huì)造成劃線不均勻，難以達(dá)到分離單菌落的目的；以達(dá)到分離單菌落的目的；二是存留在劃破處的單個(gè)細(xì)胞無法二是存留在劃破處的單個(gè)細(xì)胞無法形成規(guī)矩的菌落，菌落會(huì)沿著劃破形成規(guī)矩的菌落，菌落會(huì)沿著劃破處生長，會(huì)形成一個(gè)條狀的菌落。處生長，會(huì)形成一個(gè)條狀的菌落。稀釋涂布平板法稀釋涂布平板
3、法本課題知識(shí)小結(jié)本課題知識(shí)小結(jié): :選擇培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基: 分離酵母菌、霉菌等真菌分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基: 分離金黃色葡萄球菌分離金黃色葡萄球菌不加氮源的無氮培養(yǎng)基不加氮源的無氮培養(yǎng)基: 分離固氮菌分離固氮菌 不加含碳有機(jī)物的無碳培養(yǎng)基不加含碳有機(jī)物的無碳培養(yǎng)基: 分離自養(yǎng)型微生物分離自養(yǎng)型微生物 加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基: 分離導(dǎo)入了目的基因的受體細(xì)胞分離導(dǎo)入了目的基因的受體細(xì)胞 加入氨基喋呤、次黃嘌呤和胸腺嘧啶核加入氨基喋呤、次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培養(yǎng)基苷的培養(yǎng)基: 分離雜交瘤細(xì)胞分離雜交瘤
4、細(xì)胞問題討論 若硝化細(xì)菌、圓褐固氮菌、不固氮的藍(lán)藻混合在一起，我們?nèi)粝趸?xì)菌、圓褐固氮菌、不固氮的藍(lán)藻混合在一起，我們配置什么樣的培養(yǎng)即可以將三種微生物分離？配置什么樣的培養(yǎng)即可以將三種微生物分離？碳源碳源氮源氮源能源能源硝化細(xì)菌硝化細(xì)菌CO2氨氨氨氨圓褐固氮菌圓褐固氮菌糖類等含糖類等含碳有機(jī)物碳有機(jī)物N2有機(jī)物有機(jī)物不固氮的藍(lán)藻不固氮的藍(lán)藻CO2銨鹽、硝酸鹽銨鹽、硝酸鹽光光 1. 1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50 50 左右時(shí)，左右時(shí)，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？溫度？ 答：答：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形
5、瓶，可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。以進(jìn)行倒平板了。2.2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？ 答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物答：通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。污染培養(yǎng)基。3.3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？平板冷凝后，為什么要將平板倒置？4.4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？ 答：答：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。，造成污染。 答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。培養(yǎng)微生物。 平板劃線的操作方法平板劃線的操作方法交叉劃線法交叉劃線法連續(xù)劃線法連續(xù)劃線法
高二生物選修1 第三課時(shí) 純化大腸桿菌 ppt
