2015屆高考生物二輪復習 專項訓練 現(xiàn)代生物科技-基因工程、細胞工程

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1、 基因工程、細胞工程檢測題 1．(12分)(2014南通模擬)利用轉(zhuǎn)基因奶牛乳腺生物反應器生產(chǎn)人的生長激素，需要構建一種能高水平表達的表達載體，選擇合適的基因啟動子至關重要。由于無法由基因表達產(chǎn)物推知啟動子的堿基序列，運用PCR技術單獨克隆啟動子存在困難?？蒲腥藛T經(jīng)過長期研究，終于發(fā)明了下圖所示的一種克隆啟動子的方法。請回答： (1)培育轉(zhuǎn)基因奶牛時，需要在生長激素編碼序列前插入________的啟動子。 (2)由基因表達產(chǎn)物無法推知啟動子堿基序列，其原因是 _____________________________________________________________

2、___________ ________________________________________________________________________。 (1) 過程①需選擇的限制酶是____________，過程③需選擇的限制酶是____________。過程④需要使用的工具酶是 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________

3、。 (4)過程④中可以根據(jù)基因編碼序列兩端的部分堿基序列設計____________進行擴增。擴增過程中，在第________輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段。 【解析】　(1)利用轉(zhuǎn)基因奶牛乳腺生物反應器生產(chǎn)人的生長激素，應使生長激素基因與乳腺蛋白基因相連接，以使乳腺細胞在產(chǎn)生乳腺蛋白的同時產(chǎn)生人的生長激素。 (2)啟動子部分不能被轉(zhuǎn)錄，與蛋白質(zhì)分子的氨基酸序列不存在對應關系，因此由基因表達產(chǎn)物無法推知啟動子堿基序列。 (3)根據(jù)圖示，過程①切出啟動子和基因編碼序列，應使用限制酶BamHⅠ，其他兩種限制酶會破壞基因編碼序列；通過過程③使啟動子序列置于克隆DNA片段

4、中間、已知序列的基因編碼序列位于兩端，應使用限制酶HindⅢ。限制酶MboⅠ與BamH Ⅰ有相同的酶切位點，會使環(huán)狀結構恢復原狀。 (4)PCR過程中，需要根據(jù)模板DNA已知的堿基序列設計引物；在擴增過程中，在第三輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段。 【答案】　(1)乳腺蛋白基因　(2)基因中啟動子的堿基序列不能被轉(zhuǎn)錄 (3)BamHⅠ　HindⅢ　耐高溫的DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶) (4)引物　三 2．(12分)(2014濱州模擬)轉(zhuǎn)基因草莓中有能表達乙肝病毒表面抗原的基因，由此可獲得用來預防乙肝的一種新型疫苗，其培育過程如圖所示(①至④代表過程，A至C代

5、表結構或細胞)： (1)圖中①過程用到的酶是________，所形成的B叫做________。 (2)②過程常用________處理農(nóng)桿菌，使之成為________細胞，利于完成轉(zhuǎn)化過程。 (3)圖中③過程叫做________________，④過程叫做________________，將葉盤培養(yǎng)成草莓幼苗的技術是________________。 (4)在分子水平上，可采用____________的方法來檢測轉(zhuǎn)基因草莓果實提取液中有無相應的抗原。 【答案】　(1)DNA連接酶 1 / 6 基因表達載體(重組質(zhì)粒) (2)CaCl2溶液(或Ca2＋)　感受態(tài) (3)脫

6、分化(去分化)　再分化　組織培養(yǎng) (4)抗原－抗體雜交 3．(12分)(2014課標Ⅱ)植物甲具有極強的耐旱性，其耐旱性與某個基因有關。若從該植物中獲得該耐旱基因，并將其轉(zhuǎn)移到耐旱性低的植物乙中，有可能提高后者的耐旱性?；卮鹣铝袉栴}： (1)理論上，基因組文庫含有生物的________基因；而cDNA文庫中含有生物的________基因。 (2)若要從植物甲中獲得耐旱基因，可首先建立該植物的基因組文庫，再從中________出所需的耐旱基因。 (3)將耐旱基因?qū)朕r(nóng)桿菌，并通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將其導入植物________的體細胞中，經(jīng)過一系列的過程得到再生植株。要確認該耐旱基因是否在再

7、生植株中正確表達，應檢測此再生植株中該基因的________，如果檢測結果呈陽性，再在田間試驗中檢測植株的________是否得到提高。 (4)假如用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交，子代中耐旱與不耐旱植株的數(shù)量比為3∶1時，則可推測該耐旱基因整合到了________(填“同源染色體的一條上”或“同源染色體的兩條上”)。 【解析】　(1)基因組文庫包含某種生物的所有基因，而cDNA文庫包含某種生物的部分基因。(2)植物甲具有極強的耐旱性，其耐旱性與某個基因有關，若要從植物甲中獲得耐旱基因，首先應建立該植物的基因組文庫，然后再從中篩選出所需的耐旱基因。(3)從植物甲中獲得該耐旱基因后，通常采用

8、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，將該耐旱基因?qū)胫参镆业捏w細胞中，經(jīng)過植物組織培養(yǎng)得到再生植株。若要確認該耐旱基因是否在再生植株中正確表達，應檢測此再生植株中該基因的表達產(chǎn)物，如果檢測結果為陽性，說明該耐旱基因已經(jīng)翻譯成相應的蛋白質(zhì)。此后還需要進行個體生物學水平的檢測，即在田間試驗中檢測植株的耐旱性是否得到提高。(4)用得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株自交，子代中耐旱和不耐旱植株的數(shù)量比為3∶1，符合基因的分離定律，可知得到的二倍體轉(zhuǎn)基因耐旱植株為雜合子，因此可推測該耐旱基因整合到了同源染色體的一條上。 【答案】　(1)全部　部分(其他合理答案也給分) (2)篩選(其他合理答案也給分) (3)乙　表達產(chǎn)物(其他

9、合理答案也給分)　耐旱性 (4)同源染色體的一條上 4．(14分)(2014青島模擬)下圖表示利用基因工程培育抗蟲棉的過程，請據(jù)圖回答下列有關問題。 (1)若限制酶Ⅰ的識別序列和切點是—↓GATC—，限制酶Ⅱ識別序列和切點是—G↓GATCC—，那么在①過程中，應用限制酶________切割質(zhì)粒，用限制酶__________切割抗蟲基因。 (2)將通過②過程得到的大腸桿菌涂布在含有________的培養(yǎng)基上，若能夠生長說明已導入了普通質(zhì)?；蛑亟M質(zhì)粒，反之則說明沒有導入。 (3)要確定抗蟲基因?qū)牒?，是否能穩(wěn)定遺傳并表達，需進行檢測和鑒定工作，則在個體水平上的鑒定過程可簡述為：

10、 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 經(jīng)篩選分析，該植株細胞中含有一個攜帶抗蟲基因的DNA片段，因此可以把它看作是雜合子。理論上，該轉(zhuǎn)基因植株自交產(chǎn)生的F1中，仍具有抗蟲特性的植株占總數(shù)的________。 (4)⑤過程所用的現(xiàn)代生物技術稱為________，從遺傳學角度來看，細胞通過⑤過程能形成棉植株的根本原因是細胞具有____

11、___________________________________。 【解析】　(1)在切割質(zhì)粒時不能同時將兩個標記基因切開，至少保留一個，所以只能用限制酶Ⅱ切割，如果用限制酶Ⅰ切割則兩個標記基因?qū)⒍紩黄茐摹６鴱哪康幕騼蓚?cè)堿基序列可知，只能用限制酶Ⅰ才可得到含目的基因的DNA片段。 (2)如果導入了重組質(zhì)粒，此時重組質(zhì)粒中四環(huán)素抗性基因能正常表達，所以如果涂布在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上的大腸桿菌群落能夠生長，說明導入了重組質(zhì)粒。 (3)在個體水平上鑒定抗蟲棉是否培育成功，可以用轉(zhuǎn)基因棉葉片飼喂害蟲，觀察害蟲存活情況；如果把攜帶一個抗蟲基因的DNA片段看作雜合子，可以認為是Aa，自交產(chǎn)

12、生的F1中仍具有抗蟲特性的植株占總數(shù)的比例為3/4。 (4)把一個細胞培養(yǎng)成植株的技術稱為植物組織培養(yǎng)，依據(jù)的原理是細胞的全能性。 【答案】　(1)Ⅱ　Ⅰ　(2)四環(huán)素 (3)讓害蟲吞食轉(zhuǎn)基因棉花的葉片，觀察害蟲的存活情況，以確定其是否具有抗蟲性狀　3/4 (4)植物組織培養(yǎng)　發(fā)育成完整個體的全部遺傳物質(zhì) 5．(12分)(能力挑戰(zhàn)題)植物葉肉細胞原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)的主要過程可用如圖所示圖解簡單表示： d,胚狀體 (1)培育胚狀體利用了________這一項生物技術，胚狀體再繼續(xù)培養(yǎng)，則可培育出完整的植株，這體現(xiàn)了________________。培養(yǎng)基中除了含有一定的營養(yǎng)外，還

13、必須含有__________等植物激素，還需要對培養(yǎng)基進行嚴格的__________。 (2)如果愈傷組織是三七葉肉細胞培養(yǎng)產(chǎn)生的，若為了獲得三七的細胞產(chǎn)物，則只需培養(yǎng)到________；若為了獲得三七的人工種子，則需要培養(yǎng)到____________。如果愈傷組織是棉花葉肉細胞培養(yǎng)產(chǎn)生的，通過基因工程要獲取抗蟲棉，目的基因?qū)朊藁ㄓ鷤M織細胞常用的方法是________________法。 (3)從葉片的葉肉細胞到獲得胚狀體的過程中，必須要經(jīng)過________________。 ①無絲分裂　②有絲分裂?、蹨p數(shù)分裂?、茉囵B(yǎng)?、輦鞔囵B(yǎng)?、拗参矬w細胞雜交　⑦細胞融合?、嗝摲只、嵩俜只?

14、 【解析】　(1)離體植物細胞通過脫分化形成愈傷組織，通過再分化形成具有根和芽的胚狀體，再通過細胞分裂、分化發(fā)育成一個完整的植株。該技術為植物組織培養(yǎng)，其原理為植物細胞的全能性。培養(yǎng)基的成分為水、無機鹽、維生素、氨基酸、蔗糖、植物激素(生長素和細胞分裂素等)等；培養(yǎng)基要求進行嚴格的滅菌。(2)三七的細胞產(chǎn)物為細胞的代謝產(chǎn)物，將三七葉肉細胞培養(yǎng)到愈傷組織即可；獲得人工種子需培養(yǎng)至胚狀體；棉花為雙子葉植物，導入抗蟲基因常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。(3)離體葉肉細胞培養(yǎng)到胚狀體的過程中必須經(jīng)過脫分化和有絲分裂形成愈傷組織，再分化和有絲分裂形成具有根和芽的胚狀體。 【答案】　(1)植物組織培養(yǎng)　植物細胞的全能

15、性　細胞分裂素、生長素　滅菌 (2)愈傷組織　胚狀體　農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化 (3)②⑧⑨ 6．(12分)(2013新課標全國卷)甲、乙是染色體數(shù)目相同的兩種二倍體藥用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小組擬培育同時含有A和B的新型藥用植物?；卮鹣铝袉栴}： (1)為了培育該新型藥用植物，可取甲和乙的葉片，先用________酶和________酶去除細胞壁，獲得具有活力的________，再用化學誘導劑誘導二者融合。形成的融合細胞進一步培養(yǎng)形成________組織，然后經(jīng)過________形成完整的雜種植株。這種培育技術稱為____________。 (2)上述雜種植株屬于多倍

16、體，多倍體是指________________________。假設甲與乙有性雜交的后代是不育的，而上述雜種植株是可育的，造成這種差異的原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)這種雜種植株可通過制作人工種子的方法來大量繁殖。經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的________________________等材料用人工薄膜包裝后可得到人工種子。

17、 【答案】　(1)纖維素　果膠　原生質(zhì)體　愈傷　再分化(或分化)　植物體細胞雜交技術 (2)體細胞中含有三個或三個以上染色體組的個體　在減數(shù)分裂過程中，前者染色體聯(lián)會異常，而后者染色體聯(lián)會正常 (3)胚狀體、不定芽、頂芽、腋芽 7．(12分)(2013海南高考)單純皰疹病毒Ⅰ型(HSV－1)可引起水泡性口唇炎。利用雜交瘤技術制備出抗HSV－1的單克隆抗體可快速檢測HSV－1?；卮鹣铝袉栴}： (1)在制備抗HSV－1的單克隆抗體的過程中，先給小鼠注射一種純化的HSV－1蛋白，一段時間后，若小鼠血清中抗________的抗體檢測呈陽性，說明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了________反應，再從小鼠的_

18、_______中獲取B淋巴細胞。將該B淋巴細胞與小鼠的________細胞融合，再經(jīng)過篩選、檢測，最終可獲得所需的雜交瘤細胞，該細胞具有的特點是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體，可將該雜交瘤細胞注射到小鼠的________中使其增殖，再從________中提取、純化獲得。 (3)通過上述方法得

19、到的單克隆抗體可準確地識別這種HSV－1蛋白，其原因是該抗體具有______________和____________等特性。 【解析】　本題考查單克隆抗體的制備過程、單克隆抗體的特點。 (1)給小鼠注射HSV－1蛋白后，小鼠體內(nèi)發(fā)生體液免疫，小鼠血清中產(chǎn)生抗HSV－1蛋白的抗體。B淋巴細胞是從小鼠的淋巴器官中(如脾、骨髓、扁桃體、胸腺等)獲取。雜交瘤細胞由B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合而來，具有兩個親本細胞的特性：既能無限增殖，又能產(chǎn)生專一抗體。 (2)若想獲得大量單克隆抗體，通常有兩種方法：一是將雜交瘤細胞在動物細胞培養(yǎng)液中培養(yǎng)，然后從動物細胞培養(yǎng)液中篩選分離出單克隆抗體；二是將雜交瘤細

20、胞注射到小鼠的腹腔中使其增殖，然后從小鼠的腹水中提取純化獲得。 (3)單克隆抗體具有特異性強、純度高的特點。 【答案】　(1)HSV－1蛋白　體液免疫　脾臟　骨髓瘤　無限增殖且產(chǎn)生專一抗體 (2)腹腔　腹水 (3)純度高　特異性強 8．(14分)(能力挑戰(zhàn)題)(2014福建理綜)Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細胞?？蒲腥藛T利用胚胎干細胞(ES細胞)對Rag2基因缺失小鼠進行基因治療。其技術流程如下圖： (1)步驟①中，在核移植前應去除卵母細胞的________。 (2)步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)到________期時， 可從其內(nèi)細胞團分離出ES細胞。 (3)步驟③中，需

21、要構建含有Rag2基因的表達載體。可以根據(jù)Rag2基因的________設計引物，利用PCR技術擴增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分別在片段兩側(cè)進行酶切獲得 Rag2基因片段。為將該片段直接連接到表達載體，所選擇的表達載體上應具有__________________________________酶的酶切位點。 (4)為檢測Rag2基因的表達情況，可提取治療后小鼠骨髓細胞的________，用抗Rag2蛋白的抗體進行雜交實驗。 【解析】　(1)步驟①為動物核移植，核移植是將動物一個體細胞(上皮細胞)的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發(fā)育成一個新

22、的胚胎，最終發(fā)育為動物個體的過程。(2)步驟②為動物細胞培養(yǎng)，當培養(yǎng)到囊胚期時，可從其內(nèi)細胞團分離出胚胎干細胞(ES細胞)。(3)利用PCR技術獲取目的基因(Rag2基因)的前提是要有一段已知目的基因(Rag2基因)的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物。由于Rag2基因的兩側(cè)是用HindⅢ限制酶和PstⅠ限制酶剪切的，為了將該片段直接連接到表達載體上，也應用HindⅢ限制酶和PstⅠ限制酶剪切載體，以確保產(chǎn)生的末端一致，再利用DNA連接酶連接起來，故所選擇的表達載體上應具有HindⅢ限制酶和PstⅠ限制酶的酶切位點。(4)為了檢測目的基因(Rag2基因)是否表達出蛋白質(zhì)，可采用抗原－抗體雜交技術，因此可用抗Rag2蛋白的抗體與治療后小鼠骨髓細胞的蛋白質(zhì)(抗原)進行雜交實驗。 【答案】　(1)細胞核　(2)囊胚　(3)核苷酸序列　HindⅢ和Pst I限制　(4)蛋白質(zhì) 希望對大家有所幫助，多謝您的瀏覽！