(江蘇專用)2019高考生物二輪復(fù)習(xí) 專題十一 生物技術(shù)實踐 考點32 酶的應(yīng)用、DNA的粗提取與鑒定課件.ppt

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1、考點32酶的應(yīng)用、DNA的粗提取與鑒定,第一篇專題十一生物技術(shù)實踐,,靜悟提綱,1.構(gòu)建酶的應(yīng)用網(wǎng)絡(luò),,核心點撥,,(1)直接使用酶、固定化酶和固定化細(xì)胞的比較,(2)制備固定化酵母菌細(xì)胞的2點說明 實驗注意事項 a.海藻酸鈉溶化時要用小火或間斷加熱,避免海藻酸鈉發(fā)生焦糊。 b.將溶化好的海藻酸鈉溶液先冷卻至室溫,再與酵母菌細(xì)胞混合,避免高溫殺死酵母菌細(xì)胞。 c.制備固定化酵母菌細(xì)胞時,應(yīng)將配制好的混合液用注射器緩慢滴加到CaC12溶液中,而不是注射,以免影響凝膠珠的形成。 海藻酸鈉溶液的濃度對包埋酵母菌細(xì)胞數(shù)量的影響 a.濃度過高,將很難形成凝膠珠。 b.濃度過低,形成的凝膠珠所包埋的酵母菌

2、細(xì)胞的數(shù)量少。,2.DNA的粗提取與鑒定操作流程 材料的選?。哼x用DNA含量相對較高的生物組織 破碎細(xì)胞(以雞血為例):雞血細(xì)胞加蒸餾水用玻璃棒 攪拌用紗布過濾收集濾液 去除雜質(zhì):利用DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,通過控制 NaCl溶液的濃度去除雜質(zhì) ,DNA的析出:將處理后的溶液過濾,加入與濾液體積相等的、冷卻的體 積分?jǐn)?shù)為95%的酒精溶液 DNA的鑒定:在溶有DNA的溶液中加入二苯胺試劑,混合均勻后將試管 置于沸水中加熱5 min,溶液變成藍(lán)色,,DNA的粗提取與鑒定實驗中的“2、4、4”,題組特訓(xùn),題組一酶的應(yīng)用

3、,1,2,3,4,5,,1.(2018江蘇七市三模)下表是某校興趣小組以某品牌洗衣粉為材料進(jìn)行的實驗探究,相關(guān)敘述正確的是(多選),A.各組實驗中洗滌物、水量相同可防止無關(guān)變量差異影響實驗結(jié)果 B.本研究的課題之一是探究某品牌加酶洗衣粉的最適洗滌溫度 C.在觀察污漬是否洗凈時,要先將洗滌物用清水漂洗幾次,晾干后再觀察 D.實驗結(jié)果表明添加酶制劑和適當(dāng)升高洗滌溫度有利于提高去污效果,,,,解析,1,2,3,4,5,答案,解析分析表格信息可知,該實驗的自變量為洗滌溫度、加酶洗衣粉和普通洗衣粉,其他變量如水量、洗滌物等為無關(guān)變量,無關(guān)變量的變化會影響實驗結(jié)果,A正確,B錯誤; 洗滌物用清水漂洗后可洗

4、去附著在洗滌物上的污漬,晾干后更易觀察比較,C正確; 從表中信息可知添加酶制劑和適當(dāng)升高洗滌溫度有利于提高去污效果,D正確。,1,2,3,4,5,1,2,3,4,5,2.(2018江蘇蘇、錫、常、鎮(zhèn)三模)下列關(guān)于酶制劑和固定化酵母細(xì)胞的敘述,正確的是 A.從酶的固定方式看,吸附法比交聯(lián)法對酶活性影響大 B.可用海藻酸鈉包埋消化酶制成多酶片用于緩解消化不良癥狀 C.將海藻酸鈉凝膠珠用無菌水沖洗,主要目的是防止雜菌污染 D.探究不同加酶洗衣粉洗滌效果實驗中,水溫和浸泡時間都屬于無關(guān) 變量,解析,,答案,解析交聯(lián)法是將酶相互連接起來,而吸附法是將酶吸附在載體表面上,可見交聯(lián)法對酶活性影響較大,A錯誤

5、; 消化酶分子較小,易從包埋材料中漏出,因此一般不用包埋法固定消化酶,B錯誤; 將海藻酸鈉凝膠珠用無菌水沖洗,主要目的是洗去CaCl2,C錯誤; 探究不同加酶洗衣粉洗滌效果實驗中,不同加酶洗衣粉是實驗的自變量,而水溫和浸泡時間等都屬于無關(guān)變量,D正確。,1,2,3,4,5,3.(2018南通考前卷)某科研小組采用80 水浴溶化海藻酸鈉,固定黑曲霉孢子(含-葡萄糖苷酶),并進(jìn)行相關(guān)催化實驗,請分析回答問題: (1)此實驗過程中采用80 水浴代替小火或者間斷加熱法溶化海藻酸鈉,其優(yōu)點是_______________________________________________________ _

6、__________。溶化的海藻酸鈉加入黑曲霉孢子懸浮液前一定要進(jìn)行____處理,海藻酸鈉的最終質(zhì)量分?jǐn)?shù)需控制在3%,原因是_________________ ____________________________________________。,1,2,3,4,5,答案,解析,80 水浴加熱能準(zhǔn)確控制溫度,溶化過程不會出現(xiàn)焦糊,且溶化時間短,冷卻,海藻酸鈉濃度太高,不易形成凝膠珠,濃度太低包埋的黑曲霉孢子少,解析此實驗過程中采用80 水浴代替小火或者間斷加熱法溶化海藻酸鈉,其優(yōu)點是80 水浴加熱能準(zhǔn)確控制溫度,溶化過程不會出現(xiàn)焦糊,且溶化時間短。溶化的海藻酸鈉加入黑曲霉孢子懸浮液前一定要

7、進(jìn)行冷卻處理,以免殺死黑曲霉孢子。海藻酸鈉的最終質(zhì)量分?jǐn)?shù)需控制在3%的原因是海藻酸鈉濃度太高不易形成凝膠珠,濃度太低包埋的黑曲霉孢子少。,1,2,3,4,5,(2)實驗過程中,初形成的凝膠珠放在CaCl2溶液中靜置30 min,目的是________________________。,形成穩(wěn)定的網(wǎng)狀凝膠結(jié)構(gòu),解析實驗過程中,初形成的凝膠珠放在CaCl2溶液中靜置30 min的目的是形成穩(wěn)定的網(wǎng)狀凝膠結(jié)構(gòu)。,答案,解析,1,2,3,4,5,(3)-葡萄糖苷酶能催化大豆苷水解為大豆苷元,pH和溫度對游離孢子和固定化凝膠珠中-葡萄糖苷酶活性影響的結(jié)果如圖表所示,由圖表可知:研究pH和溫度對葡萄糖苷酶

8、活性影響時,溫度和pH應(yīng)分別控制為________、________;與游離孢子相比,固定化凝膠珠中-葡萄糖苷酶的pH適宜范圍________,熱穩(wěn)定性________。,30 ,4.8,增大,提高,答案,1,2,3,4,5,,解析,1,2,3,4,5,解析分析表格可知,當(dāng)處理溫度為30 時,游離孢子和固定化凝膠珠的轉(zhuǎn)化率均最高,隨溫度的升高,游離孢子的轉(zhuǎn)化率降低的幅度較固定化凝膠珠的轉(zhuǎn)化率降低的幅度大;分析曲線圖可知,當(dāng)pH為4.8時,游離孢子和固定化凝膠珠的轉(zhuǎn)化率均最高,pH高于或低于4.8時,游離孢子的轉(zhuǎn)化率降低的幅度較固定化凝膠珠的轉(zhuǎn)化率降低的幅度大。可見,研究pH和溫度對葡萄糖苷酶活

9、性影響時,溫度和pH應(yīng)分別控制為30 、4.8。與游離孢子相比,固定化凝膠珠中-葡萄糖苷酶的pH適宜范圍增大,熱穩(wěn)定性提高。,1,2,3,4,5,題組二DNA技術(shù) 4.某同學(xué)用洋蔥進(jìn)行DNA粗提取和鑒定實驗,下列操作錯誤的是 A.加入洗滌劑后用力進(jìn)行快速、充分的研磨 B.用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的DNA C.加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌 D.加二苯胺試劑搖勻后沸水浴加熱,1,2,3,4,5,,解析破碎植物細(xì)胞時,加入洗滌劑后,動作要輕緩、柔和,否則容易產(chǎn)生大量的泡沫,不利于后續(xù)步驟的操作,A錯誤。,解析,答案,5.某生物興趣小組開展DNA粗提取的相關(guān)探究活動,具體步驟如下。 材料處理:稱取新

10、鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份,每份10 g。剪碎后分成兩組,一組置于20 、另一組置于20 條件下保存24 h。 DNA粗提?。旱谝徊剑簩⑸鲜霾牧戏謩e放入研缽中,各加入15 mL研磨液,充分研磨。用兩層紗布過濾,取濾液備用。 第二步:先向6只小燒杯中分別注入10 mL濾液,再加入20 mL體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌,使絮狀物纏繞在玻璃棒上。,1,2,3,4,5,第三步:取6支試管,分別加入等量的質(zhì)量濃度為2 molL1 NaCl溶液溶解上述絮狀物。 DNA檢測:在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑,混合均勻后,置于沸水浴中加熱5 min,待試管冷卻后比較溶液的

11、顏色深淺,結(jié)果(如表)。,注:“”越多表示顏色越深。,1,2,3,4,5,分析上述實驗過程,回答下面的問題: (1)該探究性實驗的課題名稱是:__________________________________ _______________。,探究不同材料和不同保存溫度對DNA,提取量的影響,解析由表格可知,該實驗的自變量是不同材料和不同保存溫度,因此該探究性實驗課題的名稱是探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響。,解析,答案,1,2,3,4,5,(2)第二步中“緩緩地”攪拌,這是為了減少__________。,DNA斷裂,解析第二步中“緩緩地”攪拌,這是為了減少DNA斷裂。,解析,

12、答案,1,2,3,4,5,(3)表中的顏色為______色,顏色的深淺代表了__________________。,藍(lán),DNA含量的多少,解析在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色。因此,表中的顏色應(yīng)該為藍(lán)色,顏色的深淺代表DNA含量的多少。,解析,答案,1,2,3,4,5,(4)DNA檢測時需在沸水浴中加熱的目的是______________,同時說明DNA對高溫有較強的_________。,加速顏色反應(yīng),耐受性,解析DNA檢測時需在沸水浴中加熱的目的是加速顏色反應(yīng),同時說明DNA對高溫有較強的耐受性。,解析,答案,1,2,3,4,5,(5)根據(jù)實驗結(jié)果,得出結(jié)論并分析。 結(jié)論1:與2

13、0 相比,相同實驗材料在20 條件下保存,DNA的提取量較多。 結(jié)論2:________________________________________________________ _____________。,等質(zhì)量的不同實驗材料,在相同的保存溫度下,從蒜黃中提取的DNA量最多,解析根據(jù)實驗結(jié)果可知:等質(zhì)量的不同實驗材料,在相同的保存溫度下,從蒜黃中提取的DNA量最多。,解析,答案,1,2,3,4,5,針對結(jié)論1,請?zhí)岢龊侠淼慕忉專篲______________________________ ____________。,低溫抑制了相關(guān)酶的活性,DNA降,解速度較慢,解析因為低溫抑制了相

14、關(guān)酶的活性,使DNA降解速度減慢,所以與20 相比,相同實驗材料在20 條件下保存,DNA的提取量較多。,解析,答案,1,2,3,4,5,(6)氯仿密度大于水,能使蛋白質(zhì)變性沉淀,與水和DNA均不相溶,且對DNA影響極小。為了進(jìn)一步提高DNA純度,依據(jù)氯仿的特性,在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是:__________________________ __________________________________________,然后用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液使DNA析出。,將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合,靜置一段時間,吸取上清液,解析氯仿密度大于水,能使蛋白質(zhì)變性沉淀,與水和DNA均不相溶,且對DNA影響極小,所以為了進(jìn)一步提高DNA純度,可將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合,靜置一段時間,吸取上清液,然后用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液使DNA析出。,解析,答案,1,2,3,4,5,

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