2019高考生物二輪復(fù)習(xí) 第八部分 生物技術(shù)實(shí)踐 專題訓(xùn)練20 微生物的利用、酶的應(yīng)用(考試專用)

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1、 專題訓(xùn)練?20 微生物的利用、酶的應(yīng)用 一、選擇題 1.要篩選得到純凈的菌種,通常在固體培養(yǎng)基上劃線分離,下列操作正確的是( ) A.每次劃線時(shí),接種環(huán)都需蘸菌液一次 B.劃線分離時(shí),需要把接種環(huán)深入到培養(yǎng)基中進(jìn)行接種 C.在超凈臺(tái)中接種時(shí)要在酒精燈火焰旁進(jìn)行 D.劃線分離后將培養(yǎng)皿正放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 答案?C 解析?采用劃線分離,菌種只蘸取一次,A?項(xiàng)錯(cuò)誤;劃線分離,接種環(huán)在培養(yǎng)基表面進(jìn)行劃線操作,B?項(xiàng) 錯(cuò)誤;微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌操作,因此,在超凈臺(tái)上接種時(shí),需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行,以防止空 氣中微生物的

2、污染,C?項(xiàng)正確;劃線分離結(jié)束后,培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中,D?項(xiàng)錯(cuò)誤。 2.下列關(guān)于制備固體培養(yǎng)基時(shí)倒平板的敘述,正確的是( ) A.倒好的培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿要進(jìn)行滅菌處理 B.應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊,以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上 C.為防止微生物污染,要在酒精燈火焰旁進(jìn)行操作 D.倒好培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿,要立即將平板倒過來放置 答案?C 解析?培養(yǎng)基應(yīng)該在倒平板之前進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,A?項(xiàng)錯(cuò)誤;倒平板時(shí),用左手將培養(yǎng)皿打開一條稍 大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約?10~20?mL)倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋, 不能打開皿蓋,B?項(xiàng)錯(cuò)

3、誤;為防止微生物污染,要在酒精燈火焰旁進(jìn)行操作,C?項(xiàng)正確;倒好培養(yǎng)基的 培養(yǎng)皿等培養(yǎng)基凝固后要倒過來放置,D?項(xiàng)錯(cuò)誤。 3.固定化酶是從?20?世紀(jì)?60?年代迅速發(fā)展起來的一種技術(shù)??蒲腥藛T用海藻酸鈉作為包埋劑來固 定小麥酯酶,以研究固定化酶的相關(guān)性質(zhì)和最佳固定條件。酶活力為固定化酶催化化學(xué)反應(yīng)的總效 率,包括酶活性和酶的數(shù)量。圖甲、乙、丙為部分研究結(jié)果。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( ) A.由圖甲可知,固定化酯酶比游離酯酶對(duì)溫度變化適應(yīng)性更強(qiáng) B.由圖乙可知,濃度

4、為?3%的海藻酸鈉包埋效果最好 C.由圖丙可知,固定化酯酶一般可重復(fù)使用?3?次,之后若繼續(xù)使用則酶活力明顯下降 1 D.固定化酶的酶活力較高,主要原因是增大了酶與底物的接觸面積 答案?D 解析?由圖甲可知,當(dāng)溫度變化時(shí),游離酶的酶活力比固定化酶變化明顯,說明固定化酯酶比游離酯 酶對(duì)溫度變化適應(yīng)性更強(qiáng),A?項(xiàng)正確;當(dāng)海藻酸鈉濃度較低時(shí),凝膠的孔徑較大,固定化酶容易流失, 所以酶活力較低,濃度大難以形成凝膠珠,B?項(xiàng)正確;由圖丙可知,當(dāng)使用次數(shù)多于?3?次時(shí),酶活力顯 著下降,C?項(xiàng)正確;固定化酶的優(yōu)點(diǎn)是不溶于水

5、,易于產(chǎn)物分離,可反復(fù)使用,能連續(xù)化生產(chǎn)且穩(wěn)定性 好,D?項(xiàng)錯(cuò)誤。 4.如圖是研究人員從紅棕壤中篩選高效分解尿素細(xì)菌的過程示意圖,下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是( ) A.在配制步驟②③的培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)先調(diào)?pH?值后髙壓蒸汽滅菌 B.步驟③純化分解尿素細(xì)菌的原理是將聚集的細(xì)菌分散,以獲得單菌落 C.步驟③采用涂布平板法接種,并需向牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入尿素 D.步驟④挑?、壑胁煌N的菌落分別接種,比較細(xì)菌分解尿素的能力 答案?C 解析?在配制步驟②③的培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)先調(diào)?pH?值后髙壓蒸汽滅菌,A?項(xiàng)正確

6、;步驟③純化分解尿素細(xì) 菌的原理是將聚集的細(xì)菌分散,以獲得單菌落,B?項(xiàng)正確;要篩選出能高效分解尿素細(xì)菌,所選用的培 養(yǎng)基要以尿素為唯一氮源,但牛肉膏和蛋白胨中都含有尿素,因此步驟③所用的培養(yǎng)基中不能含有 牛肉膏蛋白胨,C?項(xiàng)錯(cuò)誤;步驟④挑?、壑胁煌N的菌落分別接種,比較細(xì)菌分解尿素的能力,D?項(xiàng)正 確。 二、非選擇題 5.(2018?寧波模擬)研究小組從土壤中篩選以多環(huán)芳烴(PAHs)為碳源和能源的細(xì)菌,用以降解工業(yè)廢 水和生活污水中的?PAHs。請(qǐng)回答下列問題。 (1)為了從土壤中篩選?PAHs?降解菌,需配制以 為唯一碳源的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基經(jīng)

7、 [A.121?℃(500?g/cm2?壓力),15?min B.90?℃(500?g/cm2?壓力),15?min C.121?℃(1?kg/cm2?壓 力),15?min D.90?℃(500?g/cm2?壓力),30?min]高壓蒸汽滅菌,待冷卻至?60?℃后倒平板。 (2)倒平板時(shí)應(yīng)使錐形瓶的瓶口通過火焰,目的 是 。在倒平板的過程中,如果培養(yǎng)基濺在皿蓋 與皿底之間的部位,則這個(gè)平板不能用來培養(yǎng)?PAHs?降解菌,原因是 。 (3)制備土壤稀釋液,用 方法接種于固體培養(yǎng)基表面,培養(yǎng)時(shí),需將培養(yǎng)皿 并放在 37?℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)?24?h

8、。 (4)用劃線法純化?PAHs?降解菌的過程中,在第二次及其后的劃線操作時(shí),須從上一次劃線的末端開 始劃線,原因是 。 2 答案?(1)PAHs C (2)防止雜菌污染 空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生 (3)涂布 倒置 (4)使細(xì)菌數(shù)隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少,最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的菌落 解析?(1)為了從土壤中篩選?PAHs?降解菌,需配制以?PAHs?為唯一碳源的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基經(jīng)過高壓蒸 汽滅菌〔121?℃(1?kg/cm2壓力),15?min〕,待冷卻至?60?℃后倒平板。

9、 (2)倒平板時(shí)應(yīng)使錐形瓶的瓶口通過火焰,目的是防止雜菌污染,在倒平板的過程中,如果培養(yǎng) 基濺在皿蓋與皿底之間的部位,則這個(gè)平板不能用來培養(yǎng)?PAHs?降解菌,原因是空氣中的微生物可能 在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。 (3)制備土壤稀釋液,用涂布方法接種于固體培養(yǎng)基表面,培養(yǎng)時(shí),需將培養(yǎng)皿倒置并放在?37?℃ 恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)?24?h。 (4)用劃線法純化?PAHs?降解菌的過程中,在第二次及其后的劃線操作時(shí),須從上一次劃線的末 端開始劃線,原因是使細(xì)菌數(shù)隨著劃線次數(shù)的增加而逐漸減少,最終得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的菌 落。 6.下圖為“大

10、腸桿菌的培養(yǎng)和分離”實(shí)驗(yàn)的基本流程,請(qǐng)回答下列問題。 A.配制培養(yǎng)基→B.滅菌→?C.培養(yǎng)(液體培養(yǎng)基)→D.劃線分離和培養(yǎng) (固體培養(yǎng)基)→E.菌種短期保存 (1)A?過程配制的是通用細(xì)菌培養(yǎng)基,稱為 培養(yǎng)基。配制時(shí)除了加入特定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以外, 還要加入一定量的氯化鈉,以維持 。對(duì)培養(yǎng)基?pH?的調(diào)節(jié),應(yīng)該在?B?過程的 (填 “前面”或“后面”)。 (2)E?過程所需的溫度是 。 (3)D?過程后,一個(gè)菌體便會(huì)形成一個(gè) ,這種分離方法是 的通用方法,也是篩 選特定菌株的最簡(jiǎn)便方法之一。 答案?(1)LB 滲透壓 前面 (2)4?℃ (3

11、)單菌落 消除雜菌污染 解析?(1)培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基為?LB?培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中加入一定濃度氯化鈉用于維持培養(yǎng)液的滲透 壓,培養(yǎng)基應(yīng)調(diào)節(jié)好?pH?后再進(jìn)行滅菌。(2)短時(shí)間內(nèi)保存菌種,將菌種接種于斜面上,置于?4?℃冰箱 進(jìn)行保存。(3)經(jīng)過分離,一個(gè)菌體形成一個(gè)單菌落,單菌落是消除雜菌污染的通用方法,也是篩選 特定菌株的最簡(jiǎn)便方法之一。 7.下列是有關(guān)大腸桿菌的培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),請(qǐng)回答下列問題。 (1)配制培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基時(shí),根據(jù)“細(xì)菌喜葷,霉菌喜素”的規(guī)律,通常在培養(yǎng)基中加入蛋白 胨和 作為營(yíng)

12、養(yǎng)物質(zhì)。 3 (2)大腸桿菌培養(yǎng)和分離的實(shí)驗(yàn)中,在 中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),培養(yǎng)液經(jīng) 后,在 LB?固體培養(yǎng)基上進(jìn)行 ,并將培養(yǎng)皿 放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),可以獲得如圖效果。 為了檢測(cè)接種、培養(yǎng)過程是否受雜菌污染以及 ,應(yīng)同時(shí)將未接種的培養(yǎng)基 放入恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 (3)對(duì)于獲得的純菌種,通??梢砸罁?jù) 的形狀、大小等特征進(jìn)行初步的鑒定。 (4)關(guān)于“大腸桿菌培養(yǎng)和分離”的操作中,下列敘述正確的是 。 A.高壓蒸汽滅菌結(jié)束時(shí),打開排氣閥使壓力表指針回到零后,開啟鍋蓋 B.倒平板時(shí),應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊,以免培養(yǎng)

13、基濺到皿蓋上 C.為了防止污染,接種工具經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落 D.用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí),應(yīng)標(biāo)記在皿底上 答案?(1)酵母提取物 (2)LB?液體培養(yǎng)基 稀釋 分離 倒置 無菌操作是否規(guī)范 (3)菌落 (4)D 解析?(1)配制培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基時(shí),根據(jù)“細(xì)菌喜葷,霉菌喜素”的規(guī)律,通常在培養(yǎng)基中加入 蛋白胨和酵母提取物作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。(2)大腸桿菌培養(yǎng)和分離的實(shí)驗(yàn)中,在?LB?液體培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò) 大培養(yǎng),培養(yǎng)液經(jīng)稀釋后,在?LB?固體培養(yǎng)基上進(jìn)行分離,并將培養(yǎng)皿倒置放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),可 以獲得如圖效果。為了檢測(cè)接種、培養(yǎng)過程是

14、否受雜菌污染以及無菌操作是否規(guī)范,應(yīng)同時(shí)將未接 種的培養(yǎng)基放入恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)。(3)對(duì)于獲得的純菌種,通??梢砸罁?jù)菌落的形狀、大小等特征 進(jìn)行初步的鑒定。(4)高壓蒸汽滅菌結(jié)束,等待壓力表指針回到零后,才能開啟鍋蓋,不能打開排氣 閥使壓力表指針回到零,A?項(xiàng)錯(cuò)誤;倒平板過程中不能打開培養(yǎng)皿的皿蓋,B?項(xiàng)錯(cuò)誤;接種環(huán)在火焰上 灼燒后,待冷卻后才可以快速挑取菌落,C?項(xiàng)錯(cuò)誤;用記號(hào)筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時(shí),應(yīng)標(biāo)記在皿底上,D 項(xiàng)正確。 8.(2018?浙江新高考研究聯(lián)盟第二次聯(lián)考)回答下列有關(guān)果膠酶生產(chǎn)及固定化應(yīng)用的問題。 (1)用射線處理一些霉菌后,稀釋并接

15、種在以較低濃度果膠為 的培養(yǎng)基中,可獲得 產(chǎn)果膠酶的高產(chǎn)菌株。通過觀察比較培養(yǎng)基上 可判斷菌株是否屬于同一種 類。 (2)在分離高產(chǎn)果膠酶菌種的試驗(yàn)操作中,對(duì)于獲得純化的果膠酶高產(chǎn)菌單菌落影響最大的 是 。 A.實(shí)驗(yàn)所用的霉菌孢子來源于多個(gè)菌株 B.涂布前涂布器未在酒精燈火焰上的灼燒滅菌 C.已添加果膠的蔗糖豆芽汁培養(yǎng)基作為選擇培養(yǎng)基 D.實(shí)驗(yàn)操作過程中未打開超凈臺(tái)的過濾風(fēng) (3)黑曲酶在發(fā)酵過程中除分泌果膠酶外,常還分泌蛋白酶、淀粉酶、欲檢測(cè)黑曲霉在某種環(huán)境下 分泌的總酶(蛋白質(zhì))量,可將提取液稀釋后加入 試劑,在特定光程下測(cè)定?O

16、D?值,并利 用以 繪 制的標(biāo)準(zhǔn)曲線定量。 (4)利用 或交聯(lián)法對(duì)果膠酶進(jìn)行固定化處理時(shí),果膠酶與介質(zhì)間均可形成新的化 學(xué)鍵,固定化酶柱使用結(jié)束后用大量清水洗滌,其目的 是 。 4 答案?(1)唯一碳源 菌落的形態(tài)特征 (2)C (3)雙縮脲 總酶(蛋白)含量為橫坐標(biāo),以?OD?值為縱 坐標(biāo)〔或反映總酶(蛋白)含量和?OD?值關(guān)系〕 (4)共價(jià)偶聯(lián)法 洗去殘留的果膠 解析?(1)獲得產(chǎn)果膠酶的高產(chǎn)菌株,應(yīng)以果膠為唯一碳源和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),并對(duì)培養(yǎng)后的菌落形態(tài)進(jìn)行 觀察,進(jìn)而確定不同菌株的類別。(2)在分離菌株時(shí),若實(shí)

17、驗(yàn)所用的霉菌孢子來源于多個(gè)菌株,可增 加菌株類型,增加選擇的方向,不會(huì)影響果膠酶高產(chǎn)菌株的篩選;涂布前,若涂布器未在酒精燈火焰 上灼燒,可能會(huì)減少菌落的數(shù)量,但對(duì)高產(chǎn)菌株的篩選、純化不會(huì)有太大影響;添加蔗糖的豆芽汁, 會(huì)使一些不能分解果膠的菌株生長(zhǎng),影響篩選;實(shí)驗(yàn)操作時(shí)未打開過濾風(fēng),可能會(huì)一定程度上影響菌 株篩選,但不會(huì)明顯影響分解果膠菌株的篩選。(3)測(cè)定蛋白質(zhì),應(yīng)加入與蛋白質(zhì)能夠發(fā)生反應(yīng)的試 劑,即雙縮脲試劑,然后以總酶的量為橫坐標(biāo),以?OD?值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。(4)若讓果膠酶和介 質(zhì)之間形成新的化學(xué)鍵,應(yīng)采用共價(jià)偶聯(lián)法和交聯(lián)法對(duì)果膠酶進(jìn)行固定化處

18、理,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,對(duì)固定 化酶柱進(jìn)行洗滌,主要目的是洗去殘留的底物,即果膠。 9.已知某細(xì)菌的兩種突變類型細(xì)菌Ⅰ和細(xì)菌Ⅱ的營(yíng)養(yǎng)條件和菌落特征都相同,但細(xì)菌Ⅰ能分解有機(jī) 物?A?而不能分解有機(jī)物?B,細(xì)菌Ⅱ能分解有機(jī)物?B?而不能分解有機(jī)物?A?,F(xiàn)有這兩種類型細(xì)菌的混 合液樣品,要將其分離,有人設(shè)計(jì)了一種方案,部分操作步驟如圖。 (1)步驟一使用的是 培養(yǎng)基,其中含有細(xì)菌生長(zhǎng)所需的水、無機(jī)鹽、碳源和氮源等營(yíng)養(yǎng)物 質(zhì),此外還必須加入 ,以利于對(duì)不同菌種進(jìn)

19、行分離操作。 (2)步驟一采用 方法接種,此接種法可使接種細(xì)菌逐漸稀釋,經(jīng)適宜條件培養(yǎng),可形成單 個(gè)、獨(dú)立的 ,最終可能得到純種的細(xì)菌;要進(jìn)行上述接種操作,必須在 及酒精燈火 焰附近進(jìn)行,以避免雜菌污染。 (3)步驟三中,若對(duì)其中某瓶培養(yǎng)液中?A、B?兩種有機(jī)物的含量進(jìn)行測(cè)定,當(dāng)培養(yǎng)液中檢測(cè)出如下的 實(shí)驗(yàn)結(jié)果,其中能說明培養(yǎng)液中只有細(xì)菌Ⅰ的是 。 A.有機(jī)物?A?與?B?含量都明顯下降 B.有機(jī)物?A?含量明顯下降,B?含量基本不變 C.有機(jī)物?A?含量基本不變,B?含量明顯下降 D.有機(jī)物?A、B?含量都基本不變 答案?(1)LB?

20、固體 瓊脂 (2)劃線 菌落 超凈臺(tái) (3)B 5 解析?(1)步驟一表示將菌種分離培養(yǎng),使用的是?LB?固體培養(yǎng)基,其中含有細(xì)菌生長(zhǎng)所需的水、無機(jī) 鹽、碳源和氮源等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì);固體培養(yǎng)基中需要加入瓊脂作為凝固劑。(2)根據(jù)題圖文字信息“蛇 形線末端”可以確定步驟一采用劃線分離接種,此接種法可使接種細(xì)菌逐漸稀釋,經(jīng)適宜條件培養(yǎng), 可形成單個(gè)、獨(dú)立的菌落,最終可能得到純種的細(xì)菌;要進(jìn)行上述接種操作,必須在超凈臺(tái)及酒精燈 火焰附近進(jìn)行,以避免雜菌污染。(3)若?A?與?B?兩種有機(jī)物含量都明顯下降,說明瓶中同時(shí)存在細(xì)菌 Ⅰ和細(xì)菌Ⅱ,說明兩者未分離;若?A?含量明顯下降,而?B?含量基本不變,說明培養(yǎng)液中只有細(xì)菌Ⅰ;若 B?含量明顯下降,而?A?含量基本不變,說明培養(yǎng)液中只有細(xì)菌Ⅱ;如果化合物?A、B?含量都基本不變, 說明培養(yǎng)液中沒有這兩種細(xì)菌。 6

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