2022年高三生物第一輪總復(fù)習(xí) 第一編 考點(diǎn)過(guò)關(guān)練 考點(diǎn)47 動(dòng)物細(xì)胞工程

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1、2022年高三生物第一輪總復(fù)習(xí) 第一編 考點(diǎn)過(guò)關(guān)練 考點(diǎn)47 動(dòng)物細(xì)胞工程 1．[xx·浙江高考]下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是(　　) A．連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞大多具有二倍體核型 B．某些癌細(xì)胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞 C．由多個(gè)祖細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群為一個(gè)克隆 D．未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系細(xì)胞具有相同的性狀 解析：連續(xù)細(xì)胞系的細(xì)胞其核型已發(fā)生改變；一個(gè)祖細(xì)胞培養(yǎng)形成的細(xì)胞群才為一個(gè)克??；未經(jīng)克隆化培養(yǎng)的細(xì)胞系細(xì)胞可能是不同細(xì)胞分裂形成的，其性狀可能不同。 答案：B 2．[xx·浙江高考]實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)(非克隆培養(yǎng))的基本過(guò)程如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)

2、 A．甲過(guò)程需要對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠進(jìn)行消毒 B．乙過(guò)程對(duì)皮膚組織可用胰蛋白酶消化 C．丙過(guò)程得到的細(xì)胞大多具有異倍體核型 D．丁過(guò)程得到的細(xì)胞具有異質(zhì)性 解析：A進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)前需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行消毒，A正確；B進(jìn)行培養(yǎng)的組織細(xì)胞用胰蛋白酶消化分散成單個(gè)細(xì)胞，B正確；C丙過(guò)程屬于原代培養(yǎng)，細(xì)胞的核型穩(wěn)定，C錯(cuò)誤；D丁過(guò)程屬于傳代培養(yǎng)，期間部分細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)異質(zhì)性，D正確； 答案：C 3．[xx·重慶高考]如圖是單克隆抗體制備流程的簡(jiǎn)明示意圖。下列有關(guān)敘述，正確的是(　　) A．①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞 B．②中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成 C．③同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨

3、髓瘤細(xì)胞的特性 D．④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群 解析：①是獲得已經(jīng)免疫的B細(xì)胞，A項(xiàng)錯(cuò)誤；胰蛋白酶使得組織塊分散為單個(gè)細(xì)胞，B項(xiàng)錯(cuò)誤；③同時(shí)具有B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的特性，C項(xiàng)錯(cuò)誤；④經(jīng)篩選后獲得能夠分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，D項(xiàng)正確。 答案：D 4．[xx·課標(biāo)全國(guó)卷Ⅰ]某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù))，結(jié)果如下圖所示。 若要制備雜交瘤細(xì)胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目40條)，并將該細(xì)胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目

4、60條)按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細(xì)胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測(cè)，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細(xì)胞。 回答下列問(wèn)題： (1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過(guò)________次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是________小鼠，理由是_______________ ____________________________________________________________。 (2)細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外

5、，可能還有___________________________________________________________________________， 體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是______________________________________ ____________________________________________________________________________。 (3)雜交瘤細(xì)胞中有________個(gè)細(xì)胞核，染色體數(shù)目最多是________條。 (4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是____________

6、________________________________________________________________。 解析：(1)據(jù)圖分析，第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗體效價(jià)均達(dá)到16000以上，小鼠Y的B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體效價(jià)最高，最適用于制備單克隆抗體。(2)融合體系中除了未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞之外，還有骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的自身融合產(chǎn)物，由于細(xì)胞膜具有流動(dòng)性，且誘導(dǎo)之后的細(xì)胞融合不具有特異性，故體系中會(huì)出現(xiàn)多種類型的細(xì)胞。(3)雜交瘤細(xì)胞形成后，小鼠的免疫B淋巴細(xì)胞核與其骨髓瘤細(xì)胞核會(huì)融合形成一個(gè)細(xì)胞核。小鼠的B淋巴細(xì)胞(染色體數(shù)目40條)和骨髓瘤細(xì)胞(染色體數(shù)目

7、60條)融合后，染色體可達(dá)100條。(4)未融合的B淋巴細(xì)胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后，仍然不是能惡性增殖的細(xì)胞，同時(shí)正常細(xì)胞的分裂次數(shù)是有限的。 答案：(1)四　Y　Y小鼠的抗體效價(jià)最高 (2)B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞　細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100% (3)1　100 (4)不能無(wú)限增殖 5．[xx·海南高考] 單純皰疹病毒Ⅰ型(HSV－Ⅰ)可引起水皰性口唇炎。利用雜交瘤技術(shù)制備出抗HSV－Ⅰ的單克隆抗體可快速檢測(cè)HSV－Ⅰ。 回答下列問(wèn)題： (1)在制備抗HSV－Ⅰ的單克隆抗體的過(guò)程中，先給小鼠注射一種純化的HSV－Ⅰ蛋白，一段時(shí)間后，若小鼠

8、血清中抗HSV－Ⅰ的抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性，說(shuō)明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了________反應(yīng)，再?gòu)男∈蟮腳_______中獲取B淋巴細(xì)胞。將該B淋巴細(xì)胞與小鼠的________細(xì)胞融合，再經(jīng)過(guò)篩選、檢測(cè)，最終可獲得所需的雜交瘤細(xì)胞，該細(xì)胞具有的特點(diǎn)是________________________________________________________________________。 (2)若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體，可將該雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的________中使其增殖，再?gòu)?________中提取、純化獲得。 (3)通過(guò)上述方法得到的單克隆抗體可準(zhǔn)確地識(shí)別這種HSV－Ⅰ蛋白，其原因是該抗

9、體具有________和________等特性。 解析：(1)由題意可知，單純皰疹病毒Ⅰ型可引起水泡性口唇炎，病毒蛋白HSV－Ⅰ可以作為一種抗原刺激機(jī)體通過(guò)免疫反應(yīng)產(chǎn)生特異性抗體。在單克隆抗體的制備過(guò)程中，首先應(yīng)注射純化的HSV－Ⅰ蛋白作為抗原，一段時(shí)間后對(duì)小鼠血清進(jìn)行檢測(cè)，如果抗HSV－Ⅰ蛋白的抗體檢測(cè)為陽(yáng)性，說(shuō)明小鼠體內(nèi)通過(guò)體液免疫產(chǎn)生了特異性抗體。此時(shí)可以從小鼠的免疫器官中，如脾臟、骨髓、淋巴結(jié)等部位獲取已免疫的B淋巴細(xì)胞，與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)過(guò)篩選檢測(cè)獲得能穩(wěn)定的產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。已免疫的B淋巴細(xì)胞具有產(chǎn)生特異性抗體的特點(diǎn)，而骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖，因此獲得的雜交瘤細(xì)胞

10、具有既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體(抗HSV－Ⅰ蛋白的抗體)的特點(diǎn)。(2)獲得大量單克隆抗體的途徑有兩種：體外培養(yǎng)和體內(nèi)培養(yǎng)。體外培養(yǎng)即通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得大量的雜交瘤細(xì)胞，進(jìn)而產(chǎn)生大量的單克隆抗體；體內(nèi)培養(yǎng)即將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的腹腔中增殖，最后從小鼠的腹水中提取、純化單克隆抗體。(3)單克隆抗體是通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)將單一的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合而獲得的，因此融合后的細(xì)胞只能產(chǎn)生一種特異性抗體，所制備的單克隆抗體具有特異性強(qiáng)，靈敏度高的特點(diǎn)。 答案：(1)免疫　免疫器官　骨髓瘤　既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體 (2)腹腔　腹水 (3)特異性強(qiáng)　靈敏度高 1．[xx·浙江嘉

11、興一模]與植物體細(xì)胞雜交相比，動(dòng)物細(xì)胞融合的原理及其特有的誘導(dǎo)因子分別是(　　) A．細(xì)胞膜的流動(dòng)性、離心 B．細(xì)胞膜的流動(dòng)性、滅活的病毒 C．細(xì)胞的全能性、電激 D．細(xì)胞的全能性、滅活的病毒 解析：植物體細(xì)胞雜交的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的全能性，動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性；動(dòng)物細(xì)胞融合常用的誘導(dǎo)因子有聚乙二醇、滅活的病毒、電激等，其中滅活的病毒是其特有的誘導(dǎo)因子，而聚乙二醇、電激均可用于誘導(dǎo)植物體細(xì)胞雜交。 答案：B 2．[xx·浙江嘉興測(cè)試]下列有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是(　　) A．惡性腫瘤細(xì)胞系具有不死性和失去接觸抑制等特性 B．利用液體培養(yǎng)基和CO

12、2培養(yǎng)箱，模擬動(dòng)物體的內(nèi)環(huán)境 C．因細(xì)胞具有相互依存關(guān)系，細(xì)胞克隆需滋養(yǎng)層細(xì)胞支持生長(zhǎng) D．細(xì)胞株沒(méi)有差異性，在連續(xù)傳代過(guò)程中遺傳性狀始終保持穩(wěn)定 解析：動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程，是細(xì)胞有絲分裂的過(guò)程，在分裂過(guò)程中，由于基因突變或染色體變異會(huì)造成遺傳物質(zhì)的改變。 答案：D 3．[xx·洛陽(yáng)統(tǒng)考]下列有關(guān)生物細(xì)胞工程的敘述正確的是(　　) A．動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)中，胚胎移植、胚胎分割、核移植和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)均可獲得動(dòng)物個(gè)體 B．用于治療癌癥的“生物導(dǎo)彈”就是以單克隆抗體作為抗癌藥物定向殺死癌細(xì)胞 C．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)的癌變發(fā)生于傳代培養(yǎng)過(guò)程中 D．動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交相比，依據(jù)

13、的原理、誘導(dǎo)融合的方法都相同，且獲得的融合細(xì)胞都具有雙親的遺傳特性 解析：胚胎移植和胚胎分割屬于胚胎工程，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不能獲得動(dòng)物個(gè)體；“生物導(dǎo)彈”中的單克隆抗體不是抗癌藥物，它可攜帶抗癌藥物定向殺死癌細(xì)胞；動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交相比，二者誘導(dǎo)融合的方法不完全相同，動(dòng)物細(xì)胞融合可借助滅活的病毒，植物體細(xì)胞雜交則不能。 答案：C 4．[xx·北京石景山期末]對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。下列說(shuō)法不正確的是(　　) A．在利用肝腫瘤組織塊制備細(xì)胞懸液時(shí)，可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理 B．細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是刺激細(xì)胞呼吸 C．為了防止

14、細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素 D．在合成培養(yǎng)基中，通常需加入血清、血漿等天然成分 解析：本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程的知識(shí)，主要考查對(duì)基礎(chǔ)知識(shí)的理解和識(shí)記能力。胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理組織塊，分解細(xì)胞間的黏著物，分散開(kāi)制備細(xì)胞懸液；細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的PH；為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素；在合成培養(yǎng)基中，通常需加入血清、血漿等天然成分。 答案：B 5．[xx·江蘇南通期末]下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程的敘述，正確的是(　　) A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中更換培養(yǎng)液的目的僅是為了補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) B

15、．雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，可獲得單克隆抗體 C．雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)培養(yǎng)，可獲得能產(chǎn)生單克隆抗體的胚胎 D．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，用胃蛋白酶處理組織使細(xì)胞分散 解析：本題考查動(dòng)物細(xì)胞工程的知識(shí)，主要考查對(duì)基礎(chǔ)知識(shí)的理解和識(shí)記能力。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中更換培養(yǎng)液的目的是為了補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，和清除代謝產(chǎn)物；雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)也可以在小鼠體內(nèi)增殖，可獲得單克隆抗體；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，用胰蛋白酶處理組織使細(xì)胞分散。 答案：B 6．[xx·北京市海淀區(qū)高三期中]對(duì)下面制備單克隆抗體的過(guò)程示意圖的敘述不正確的是(　　) A．①表示B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞均是從小鼠的脾臟中提取的 B．④中的篩

16、選是通過(guò)抗原、抗體反應(yīng)實(shí)現(xiàn)的 C．②促進(jìn)細(xì)胞融合的過(guò)程可以利用聚乙二醇作介導(dǎo) D．⑤可以無(wú)限增殖 解析：①表示提取過(guò)程，指的是從小鼠的脾臟內(nèi)提取B淋巴細(xì)胞，從骨髓中提取骨髓瘤細(xì)胞。 答案：A 7．[xx·北京西城期末]某小鼠生活過(guò)程中被多種病原體感染過(guò)，科學(xué)家以該小鼠為實(shí)驗(yàn)材料，利用單克隆抗體技術(shù)，獲得了抗某種病原體的高純度單克隆抗體。下列敘述不正確的是(　　) A．被多種病原體感染過(guò)的小鼠體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生多種效應(yīng)B細(xì)胞 B．經(jīng)細(xì)胞融合后形成的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞可分泌多種特異性抗體 C．用“抗原—抗體檢測(cè)法”可篩選出產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞 D．單克隆抗體的制備過(guò)程中使用了細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)

17、胞融合技術(shù) 解析：經(jīng)細(xì)胞融合后形成的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體。 答案：B 8．[xx·江蘇無(wú)錫期末]人乳頭狀瘤病毒(HPV)與宮頸癌的發(fā)生密切相關(guān)，抗HPV的單克隆抗體可以準(zhǔn)確檢測(cè)出HPV，從而及時(shí)監(jiān)控宮頸癌的發(fā)生，以下是以HPV衣殼蛋白為抗原制備出單克隆抗體的過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答： (1)上述單克隆抗體制備過(guò)程中涉及的細(xì)胞工程技術(shù)有 ________________________________________________________________________。 (2)雜交瘤細(xì)胞中染色體數(shù)目與普通淋巴細(xì)胞相比具有的特點(diǎn)是________，

18、在HAT培養(yǎng)基上存活的細(xì)胞可能包括________(填下列序號(hào)) ①無(wú)抗體分泌的細(xì)胞②抗HPV抗體的分泌細(xì)胞③其它無(wú)關(guān)抗體的分泌細(xì)胞 (3)對(duì)于抗體檢測(cè)呈________性的雜交細(xì)胞應(yīng)盡早進(jìn)行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀釋法，即稀釋細(xì)胞到3～10個(gè)細(xì)胞/mL，每孔加入細(xì)胞稀釋液________mL(0.1/1/10)，使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的。 (4)由上述過(guò)程生產(chǎn)出的單克隆抗體不能直接用于人體，理由是________________________________________________________________________。 (5)科

19、學(xué)家從某些無(wú)限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出了無(wú)限增殖調(diào)控基因(prG)，該基因能激發(fā)動(dòng)物細(xì)胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更多的思路。除本題描述的一種制備單克隆抗體技術(shù)外，請(qǐng)?jiān)俸?jiǎn)要寫(xiě)出一種制備單克隆抗體的思路____________________ ____________________________________________________________________________。 解析：本題考查單克隆抗體制備過(guò)程的知識(shí)，主要考查對(duì)基礎(chǔ)知識(shí)的理解和識(shí)記能力。(1)圖中單克隆抗體制備過(guò)程中涉及的細(xì)胞工程技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合。(2)雜交瘤細(xì)胞是兩個(gè)細(xì)胞融合得到，染色

20、體數(shù)目與普通淋巴細(xì)胞相比具有的特點(diǎn)是染色體數(shù)目加倍，在HAT培養(yǎng)基上存活的細(xì)胞可能包括無(wú)抗體分泌的細(xì)胞、抗HPV抗體的分泌細(xì)胞、其它無(wú)關(guān)抗體的分泌細(xì)胞。(3)對(duì)于抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交克隆應(yīng)盡早進(jìn)行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀釋法，即稀釋細(xì)胞到3～10個(gè)細(xì)胞/mL，每孔加入細(xì)胞稀釋液0.1 mL，使每個(gè)孔內(nèi)不多于一個(gè)細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的。(4)由上述過(guò)程生產(chǎn)出的單克隆抗體不能直接用于人體，因?yàn)樾∈笮纬傻目贵w對(duì)人體來(lái)說(shuō)是抗原，存在著排異反應(yīng)。(5)制備單克隆抗體的新思路是通過(guò)基因工程向漿細(xì)胞中導(dǎo)入prG、利用核移植技術(shù)將漿細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的無(wú)限增殖細(xì)胞中。 答案：(1)動(dòng)物細(xì)

21、胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合 (2)染色體數(shù)目加倍?、佗冖? (3)陽(yáng)　0.1 (4)因?yàn)樾∈笮纬傻目贵w對(duì)人體來(lái)說(shuō)是抗原，存在著排異反應(yīng) (5)通過(guò)基因工程向漿細(xì)胞中導(dǎo)入prG、利用核移植技術(shù)將漿細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的無(wú)限增殖細(xì)胞中(答對(duì)其一即可) 9．[xx·浙江寧波期末]下圖為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞增殖情況的變化曲線(圖中B、E兩點(diǎn)表示經(jīng)篩選、分裝后繼續(xù)培養(yǎng))，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題： (1)OB段的培養(yǎng)稱為_(kāi)_______培養(yǎng)，AB段可能發(fā)生了________現(xiàn)象，使增殖速率減緩，用________酶可使組織細(xì)胞分散開(kāi)來(lái)，分裝到多個(gè)卡氏瓶中進(jìn)行________培養(yǎng)。 (2)B點(diǎn)的細(xì)

22、胞群體稱為_(kāi)_______。B點(diǎn)時(shí)篩選出一個(gè)細(xì)胞，通過(guò)________方法單獨(dú)培養(yǎng)使之繁衍成一個(gè)新的細(xì)胞群體，該細(xì)胞群體稱為_(kāi)_______。 (3)E點(diǎn)后的細(xì)胞大多數(shù)具有________核型，從而可連續(xù)傳代。 解析：本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程的知識(shí)，主要考查對(duì)基礎(chǔ)知識(shí)的理解和識(shí)記能力。(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)包括原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩個(gè)過(guò)程，10代以內(nèi)的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)，此時(shí)發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象，用胰蛋白酶可使組織細(xì)胞分散開(kāi)來(lái)，分裝到多個(gè)卡氏瓶中進(jìn)行傳代培養(yǎng)。(2)B點(diǎn)的細(xì)胞群體稱為細(xì)胞系，B點(diǎn)時(shí)篩選出一個(gè)細(xì)胞，通過(guò)克隆培養(yǎng)法單獨(dú)培養(yǎng)使之繁衍成一個(gè)新的細(xì)胞群體，該細(xì)胞群體稱為細(xì)胞株。(3)E點(diǎn)后的細(xì)胞

23、發(fā)生了基因突變，大多數(shù)具有異倍體核型，從而可連續(xù)傳代。 答案：(1)原代　接觸抑制　胰蛋白　傳代 (2)細(xì)胞系　克隆培養(yǎng)　細(xì)胞株 (3)異倍體 10．[xx·東城區(qū)普通校聯(lián)考]克隆豬成功率較低，與早期胚胎細(xì)胞的異常凋亡有關(guān)。Bcl－2基因是細(xì)胞凋亡抑制基因，用PCR技術(shù)可以檢測(cè)該基因轉(zhuǎn)錄水平，進(jìn)而了解該基因與不同胚胎時(shí)期細(xì)胞凋亡的關(guān)系?？寺∝i的培育及該基因轉(zhuǎn)錄水平檢測(cè)流程如圖。 請(qǐng)回答： (1)圖中①過(guò)程采用的技術(shù)手段稱做________技術(shù)。 (2)②過(guò)程所用的培養(yǎng)液與植物組織的培養(yǎng)基從成分上主要區(qū)別是前者必須含有________。 (3)在PCR過(guò)程中可檢測(cè)出cDNA中

24、Bcl－2 cDNA的分子數(shù)，進(jìn)而計(jì)算總mRNA中Bcl－2 mRNA的分子數(shù)，從而反映出Bcl－2基因的轉(zhuǎn)錄水平。 ①圖中X表示________過(guò)程。 ②從基因組數(shù)據(jù)庫(kù)中查詢Bcl－2 mRNA的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列設(shè)計(jì)合成2種________用于PCR擴(kuò)增，除此以外在PCR反應(yīng)體系中還應(yīng)包含的主要成分有擴(kuò)增緩沖液、水、4種脫氧核苷酸、模板DNA以及________。 ③PCR擴(kuò)增過(guò)程第一輪循環(huán)的模板是________。 (4)克隆豬的成功培育說(shuō)明_____________________________________________。 解析：本題主要考查單克隆抗體制備的

25、過(guò)程的知識(shí)；意在考查考生識(shí)記和理解能力。(1)①是體細(xì)胞和去核的卵母細(xì)胞形成重組細(xì)胞，該過(guò)程的技術(shù)為體細(xì)胞核移植。(2)②動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程培養(yǎng)液中需添加血清。(3)由mRNA獲得cDNA的過(guò)程為逆轉(zhuǎn)錄。PCR擴(kuò)增過(guò)程中需2種引物。擴(kuò)增過(guò)程中需TaqDNA聚合酶。PCR擴(kuò)增過(guò)程第一輪循環(huán)的模板是逆轉(zhuǎn)錄形成的Bcl－2 cDNA。(4)克隆豬的成功說(shuō)明了高度分化的動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性。 答案：(1)體細(xì)胞核移植 (2)動(dòng)物(豬)血清 (3)①逆轉(zhuǎn)錄?、谝铩aqDNA聚合酶(耐高溫DNA聚合酶)?、跙cl－2 cDNA (4)高度分化的動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性 11．[xx·甘肅蘭州第一次

26、診斷]下圖可表示細(xì)胞融合技術(shù)的一些過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答： (1)若A、B細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞，A、B融合為C的過(guò)程說(shuō)明了細(xì)胞膜具有________。若A、B到C的過(guò)程是體外受精過(guò)程，則精子必須進(jìn)行________處理，卵子必須發(fā)育到________期，用________處理，可以獲得較多的卵子。 (2)若A、B細(xì)胞為植物細(xì)胞，那么這樣的細(xì)胞已經(jīng)用酶降解脫掉了________，這種酶可能是________酶。A、B到C細(xì)胞的過(guò)程中，常用的物理方法是________；融合完成的標(biāo)志是__________________________；形成的D細(xì)胞還要應(yīng)用________技術(shù)把D培養(yǎng)成植株。培養(yǎng)過(guò)程

27、中，所用的固體培養(yǎng)基除了添加水、無(wú)機(jī)鹽、糖等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，還必須加入________和細(xì)胞分裂素等調(diào)節(jié)物質(zhì)。 (3)若A細(xì)胞為骨髓瘤細(xì)胞，B細(xì)胞為能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞，那么D細(xì)胞稱為_(kāi)_______細(xì)胞，這種細(xì)胞既能無(wú)限繁殖，又能產(chǎn)生_______________________________。 (4)若該過(guò)程是制備單克隆抗體的過(guò)程，在A、B到C的過(guò)程中，所形成的C有________種(僅限于兩個(gè)細(xì)胞的融合)，用來(lái)培養(yǎng)的D細(xì)胞應(yīng)該是________。從中選擇出它的方法是在特定的________培養(yǎng)基中培養(yǎng)。 解析：本題考查細(xì)胞工程的應(yīng)用知識(shí)，主要考查對(duì)基礎(chǔ)知識(shí)的理解和識(shí)記能力。(1)細(xì)胞

28、融合過(guò)程說(shuō)明了細(xì)胞膜具有流動(dòng)性，體外受精過(guò)程精子必須進(jìn)行獲能處理，卵子必須發(fā)育到減數(shù)第二次分裂中期，用促性腺激素處理，可以獲得較多的卵子。(2)若A、B細(xì)胞為植物細(xì)胞，那么這樣的細(xì)胞已經(jīng)用酶降解去除了細(xì)胞壁，常用的酶是纖維素酶和果膠酶，誘導(dǎo)細(xì)胞融合常用的物理方法是離心、振動(dòng)、電刺激，融合完成的標(biāo)志是形成了新的細(xì)胞壁，形成的D細(xì)胞還要應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)成植株，所用的固體培養(yǎng)基除了添加水、無(wú)機(jī)鹽、糖等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，還必須加入生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素等調(diào)節(jié)物質(zhì)。(3)骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合得到雜交瘤細(xì)胞，特點(diǎn)是這種細(xì)胞既能無(wú)限繁殖，又能產(chǎn)生單克隆抗體。(4)若該過(guò)程是制備單克隆抗體的過(guò)程，骨髓瘤細(xì)胞

29、和B淋巴細(xì)胞融合會(huì)出現(xiàn)AA融合、BB融合、AB融合3種細(xì)胞，進(jìn)行培養(yǎng)的是融合的雜交瘤細(xì)胞，從中選出它的方法是在特定的選擇性培養(yǎng)基中培養(yǎng)。 答案：(1)流動(dòng)性　獲能　減數(shù)第二次分裂中　促性腺激素 (2)細(xì)胞壁　纖維素酶和果膠　離心、振動(dòng)、電刺激　形成了新的細(xì)胞壁　植物組織培養(yǎng)　生長(zhǎng)素 (3)雜交瘤細(xì)胞　單克隆抗體(特異性抗體) (4)3　融合的雜交瘤細(xì)胞　選擇性 12．[xx·河北唐山一模]某實(shí)驗(yàn)室做了下圖所示的實(shí)驗(yàn)研究，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題。 (1)與纖維母細(xì)胞相比，過(guò)程①形成的誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性較________。 (2)過(guò)程②是誘導(dǎo)干細(xì)胞中基因________的結(jié)果。 (

30、3)過(guò)程③需要用________性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，得到的Z細(xì)胞還需進(jìn)行________培養(yǎng)和________，經(jīng)多次篩選，就可以得到足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。 (4)科學(xué)家找到一種“無(wú)限增殖調(diào)控基因”能激發(fā)細(xì)胞不斷分裂，通過(guò)基因工程技術(shù)將該基因?qū)氪ǖ腳_______細(xì)胞(填細(xì)胞名稱)，來(lái)制備單克隆抗體，基因?qū)氩⒊晒Ρ磉_(dá)后，受體細(xì)胞將具有______________________________________________________ 的特點(diǎn)，在上述操作中用到了PCR擴(kuò)增儀，其作用是_________________________ __________________

31、__________________________________________________________。 解析：(1)纖維母細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞，誘導(dǎo)干細(xì)胞分化程度較低，所以誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性要比纖維母細(xì)胞的全能性高。 (2)由誘導(dǎo)干細(xì)胞分化為肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、上皮細(xì)胞等體細(xì)胞是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果。 (3)X細(xì)胞、Y細(xì)胞的融合有X細(xì)胞與X細(xì)胞的融合、Y細(xì)胞與Y細(xì)胞的融合、X細(xì)胞和Y細(xì)胞的融合，需要用選擇培養(yǎng)基對(duì)此培養(yǎng)篩選出X細(xì)胞和Y細(xì)胞的融合體，然后進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，專一抗體檢測(cè)，呈陽(yáng)性后方能大規(guī)模培養(yǎng)。 (4)能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞是漿細(xì)胞，制備單克隆抗體的細(xì)胞應(yīng)具有不斷增殖

32、的能力和產(chǎn)生抗體的能力，PCR擴(kuò)增儀能夠快速大量復(fù)制DNA片段。 答案：(1)高 (2)選擇性表達(dá) (3)選擇　克隆化　抗體檢測(cè) (4)漿(受體)　既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生專一的抗體　大量獲得目的基因 下圖為利用人成纖維細(xì)胞(具分裂能力、能在HAT培養(yǎng)基上存活)和小鼠骨髓瘤細(xì)胞(具分裂能力、不能在HAT培養(yǎng)基上存活)進(jìn)行人類基因定位的操作示意圖，請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題。 (1)圖示方法是________________技術(shù)的應(yīng)用，該技術(shù)的基礎(chǔ)是________________技術(shù)。 (2)操作所用的成纖維細(xì)胞應(yīng)傳________代以內(nèi)，誘導(dǎo)融合時(shí)需要加入的促融劑是_______

33、_。 (3)人、鼠細(xì)胞先經(jīng)過(guò)細(xì)胞膜融合形成________________________細(xì)胞，再經(jīng)過(guò)一次__________________，形成單核細(xì)胞。 (4) HAT培養(yǎng)基起________培養(yǎng)作用，培養(yǎng)時(shí)溫度應(yīng)為_(kāi)_______℃，操作中加入烏本苷的目的是________________________________。 (5)下表所示為雜交細(xì)胞A、B、C中存在的人類染色體及人類特有的4種酶(“＋”表示存在，“－”表示不存在)，這4種酶均為單基因編碼產(chǎn)生，據(jù)表判斷，編碼________酶的基因位于染色體2上，排列方式呈________。 雜交細(xì)胞 A B C 人類

34、 染色體 1 － ＋ ＋ 2 ＋ － ＋ 3 ＋ ＋ － 酶 m ＋ － ＋ n － ＋ ＋ p ＋ － ＋ q － ＋ ＋ 解析：(1)圖示骨髓瘤細(xì)胞與成纖維細(xì)胞通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞融合形成雜交細(xì)胞，此技術(shù)的基礎(chǔ)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)通常為10代以內(nèi)，可以保持細(xì)胞正常的二倍體核型。(3)人、鼠細(xì)胞經(jīng)過(guò)細(xì)胞膜融合會(huì)成為多核細(xì)胞，再經(jīng)過(guò)一次有絲分裂，形成單核細(xì)胞。(4)據(jù)題干信息，人成纖維細(xì)胞能在HAT培養(yǎng)基上存活，而小鼠骨髓瘤細(xì)胞不能在HAT培養(yǎng)基上存活，則HAT培養(yǎng)基起選擇作用，篩選出人成纖維細(xì)胞和成纖維細(xì)胞融合的雜交細(xì)胞，操作中加入烏本苷的目的是除去成纖維細(xì)胞，篩選出雜交細(xì)胞。(5)雜交細(xì)胞A和C中都有染色體2，細(xì)胞A和C中均有酶m和p，即編碼m和p酶的基因位于染色體2上；該基因在染色體上呈線性排列。 答案：(1)動(dòng)物細(xì)胞融合　動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) (2)10　PEG(或滅活病毒) (3)多核　有絲分裂 (4)選擇　36.5±0.5　除去成纖維細(xì)胞 (5)m和p　線性