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1、章末復習提升課(五)
植物組織培養(yǎng)
影響植物組織培養(yǎng)的因素
1.內部因素
不同的植物組織,培養(yǎng)的難易程度差別很大;同一種植物材料,材料的年齡、保存時間的長短等也會影響實驗結果。
2.外部因素
(1)營養(yǎng)成分:MS培養(yǎng)基,主要成分包括:大量元素,如N、P、K、Ca、S、Mg等;微量元素,如B、Mn等;有機物,如甘氨酸、維生素、蔗糖等。
(2)植物激素:啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素是生長素和細胞分裂素,二者的濃度及用量的比例和使用的先后順序都會影響實驗結果。
(3)其他因素:酸堿度、溫度、光照等。
細胞全能性大小與細胞種類的關系
1.受精卵>
2、生殖細胞>體細胞;植物細胞>動物細胞;分化程度低的細胞>分化程度高的細胞。
2.一般地說,離體后的植物細胞的全能性在一定條件下可充分體現(xiàn)。
3.離體后的動物細胞的全能性受到限制,但其細胞核的全能性借助卵細胞的細胞質可體現(xiàn)出來。
4.未離體的細胞的全能性不能表達,只是在機體的調控下,進行定向分化。
脫分化、再分化與植物生長過程的比較
過程名稱
過程
形成體特點
條件
脫分化
由外植體成為愈傷組織
排列疏松、高度液泡化的薄壁細胞團
①離體
②提供營
養(yǎng)物質(有機物、無機物)
③提供激素
④提供其他適宜條件
再分化
由愈傷組織成為幼苗或胚狀體結構
有根
3、、芽或有生根發(fā)芽的能力
營養(yǎng)生
長、生殖
生長
發(fā)育成完整的
植物體
由根、莖、葉、花、果
實、種子
組成
栽培
章末綜合測評(五)
(時間:45分鐘 滿分:100分)
一、選擇題(每小題6分,共60分)
1.生物體內細胞沒有表現(xiàn)出全能性,原因是( )
A.細胞喪失了全能性
B.基因的表達有選擇性
C.基因發(fā)生了變化
D.不同細胞基因不同
【解析】 在生物體內細胞沒有表現(xiàn)出全能性,而是分化為不同的組織、器官,這是基因在特定的時間和空間條件下選擇性表達的結果。
【答案】 B
2.下列有關月季快速繁殖的說法正確的是( )
A.需要有三種培養(yǎng)基,其營
4、養(yǎng)成分中的碳源應該是無機碳源
B.要用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基進行滅菌,即在100 ℃下保持15分鐘
C.在培養(yǎng)過程中要先讓愈傷組織生根后再使其生芽
D.用酒精對外植體進行消毒時,持續(xù)的時間不能太長
【解析】 月季的快速繁殖使用的是植物組織培養(yǎng)技術,在培養(yǎng)時應對培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌(98 kpa,20 min);愈傷組織因為不能進行光合作用,需要有機碳源;誘導再分化時,應先誘導生芽,后誘導生根。酒精能殺死植物細胞,所以對外植體消毒時,時間不能太長。
【答案】 D
3.在植物種苗脫毒過程中,不涉及細胞的( )
A.有絲分裂 B.分化
C.減數(shù)分裂 D.全能性
【
5、解析】 種苗脫毒過程建立在體細胞組織培養(yǎng)的基礎上,是體細胞經(jīng)過脫分化和再分化形成個體的過程,表現(xiàn)了植物細胞的全能性。整個過程只有有絲分裂。
【答案】 C
4.一般情況下,對外植體進行消毒的方法是( )
A.高壓蒸汽滅菌法 B.火焰灼燒法
C.化學試劑法 D.無菌水清洗法
【解析】 外植體先用清水洗凈,再用體積分數(shù)為70%的酒精浸5 s后,放入質量分數(shù)為2%的次氯酸鈉溶液中浸泡;后用無菌水漂凈消毒液。
【答案】 C
5.脫分化培養(yǎng)基的成分構成是( )
A.MS培養(yǎng)基的配制+6-BA+IAA
B.MS培養(yǎng)基的配制+IAA
C.MS培養(yǎng)基的配制+6-BA
D.MS培養(yǎng)基
6、的配制+NAA+IAA
【解析】 本題為識記內容,當同時加入6-BA和IAA時,能夠誘導外植體脫分化形成愈傷組織。
【答案】 A
6.組織培養(yǎng)技術需要在無菌條件下完成,下列哪些植物的組織、器官或細胞,在人工控制環(huán)境里容易形成完整的植株( )
①莖尖?、诨ㄋ帯、圩臃勘凇、鼙”诩毎、菪纬蓪蛹毎、薷獬墒靺^(qū)細胞
A.①②⑤ B.②③④
C.③⑤⑥ D.①②④
【解析】 依據(jù)細胞全能性表達的先后順序,全能性容易表達的組織是分化程度較低的組織。有些薄壁細胞屬于高度分化的細胞,全能性相對較低;莖尖和形成層細胞屬于分生組織,分化程度低,全能性較高;花藥屬于生殖細胞,盡管分化程度相當高
7、,但是全能性也較高。
【答案】 A
7.采用莖尖等分生組織培養(yǎng)出來的植物一般很少有植物病毒的危害,其原因是( )
①分生區(qū)維管束尚未形成,病毒通過胞間連絲移動到分生區(qū)的速度遠不及細胞分裂的速度快
②在組織培養(yǎng)過程中的細胞進行的是快速分裂和分化
③在人工配制的培養(yǎng)基上,病毒根本無法生存
④進行組織培養(yǎng)的植物體內水分太少,無機鹽含量太高
⑤進行組織培養(yǎng)的過程都是在無菌和無毒條件下進行的
A.①②③ B.②③④
C.③④⑤ D.①②⑤
【解析】 組織培養(yǎng)出的植物一般很少有病毒是因為:①分生區(qū)維管束尚未形成,病毒很難到達;②組織培養(yǎng)的過程都是在無菌無毒條件下進行的;③組織培養(yǎng)
8、的細胞分裂、分化較快,病毒不易感染。
【答案】 D
8.無菌技術是植物組織培養(yǎng)能否獲得成功的關鍵,以下說法正確的是( )
①由于植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差,對無菌操作的要求非常嚴格
②對培養(yǎng)基及器械用高壓蒸汽滅菌
③對培養(yǎng)材料進行表面消毒時,一方面要考慮藥劑的消毒效果,另一方面還要考慮植物材料的耐受能力
④不同藥劑、不同植物材料甚至不同器官要區(qū)別對待
⑤對培養(yǎng)材料可用高壓蒸汽滅菌
⑥如果不小心導致污染,將可能造成培養(yǎng)工作的前功盡棄
A.①②③④⑤ B.①②③④
C.①②③④⑥ D.①②③④⑤⑥
【解析】 無菌操作是植物組織培養(yǎng)技術的關鍵,如果滅菌不好
9、就會導致整個培養(yǎng)工作的失敗。對于整個操作過程中凡是和植物組織接觸的材料、用具和試劑都要進行滅菌、消毒。但不同的用具、材料要用不同的方法進行處理,如培養(yǎng)基的滅菌用高壓蒸汽滅菌法,而植物組織用消毒液進行消毒而不能用高壓蒸汽滅菌。
【答案】 C
9.利用植物組織培養(yǎng)技術可以培育或生產(chǎn)出( )
A.食品添加劑 B.無病毒植株
C.人工種子 D.A、B、C都是
【解析】 植物組織培養(yǎng)技術的作用較廣泛??梢陨a(chǎn)食品添加劑,可用于植物脫毒,也可生產(chǎn)人工種子。
【答案】 D
10.下列說法不正確的是( )
A.植物快速繁殖可以保護瀕危的植物、名貴花木等
B.植物組織培養(yǎng)可以實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化
10、,便于自動化管理
C.植物組織培養(yǎng)是一種無性繁殖
D.植物的花粉、花藥等不可以用于植物組織培養(yǎng)
【解析】 植物的花粉、花藥等生殖細胞的全能性比體細胞還高。因此,可以用它們進行植物組織培養(yǎng)。
【答案】 D
二、非選擇題(共40分)
11.(20分)辣椒素作為一種生物堿廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工業(yè)等領域。辣椒素的獲得途徑如圖。
(1)圖中①和②分別表示辣椒組織培養(yǎng)中細胞的________和________過程。
(2)圖中培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基中常用的凝固劑是________。培養(yǎng)基中的生長素和細胞分裂素用量的比值________(填“高”或“低”)時,有利于芽的分化。對培養(yǎng)基徹底滅
11、菌時,應采用的滅菌方法是____________。
(3)圖中外植體的消毒所需酒精的體積分數(shù)是________。用酶解法將愈傷組織分離成單細胞時,常用的酶是________和纖維素酶。
(4)提取辣椒素過程中,萃取加熱時需安裝冷凝回流裝置,其目的是______________________。
【解析】 (1)由高度分化的植物組織或細胞產(chǎn)生愈傷組織的過程稱為脫分化,脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進行培養(yǎng),又可重新分化成根或芽等器官,這個過程叫做再分化。
(2)培養(yǎng)基中常用的凝固劑是瓊脂。同時使用生長素和細胞分裂素時,兩者用量的比例影響植物細胞的發(fā)育方向。生長素和細胞分裂素用量的比值低時,有利
12、于芽的分化;反之則利于根的分化。培養(yǎng)基應用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌。
(3)外植體消毒所用酒精的體積分數(shù)是70%。酶解法將愈傷組織分離成單細胞所用的酶是果膠酶和纖維素酶。
(4)用萃取法提取植物有效成分時,應在加熱瓶口安裝冷凝回流裝置,目的是防止加熱時有機溶劑揮發(fā)。
【答案】 (1)脫分化(或去分化) 再分化 (2)瓊脂 低 高壓蒸汽滅菌 (3)70% 果膠酶 (4)防止有機溶劑的揮發(fā)
12.(20分)(2014·江蘇高考)為了獲得植物次生代謝產(chǎn)物,先用植物外植體獲得愈傷組織,然后在液體培養(yǎng)基中懸浮培養(yǎng)。請回答下列問題:
(1)外植體經(jīng)誘導后形成愈傷組織的過程稱為________?!?
(
13、2)在愈傷組織懸浮培養(yǎng)時,細胞干重、蔗糖濃度和pH的變化如下圖所示。細胞干重在12 d后下降的原因有__________________________;培養(yǎng)液中蔗糖的作用是________、________。
(3)多倍體愈傷組織細胞產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物量常高于二倍體。二倍體愈傷組織細胞經(jīng)________處理,會產(chǎn)生染色體加倍的細胞。為檢測愈傷組織細胞染色體數(shù)目,壓片前常用纖維素酶和________酶解離愈傷組織。若愈傷組織細胞(2n)經(jīng)誘導處理后,觀察到染色體數(shù)為8n的細胞,合理的解釋是________、________。
(4)為了更好地獲得次生代謝產(chǎn)物,生產(chǎn)中采用植物細胞的固定化
14、技術,其原理與酵母細胞固定化類似。下列說法正確的有________(填序號)。
①選取旺盛生長的愈傷組織細胞包埋 ②必須在光照條件下培養(yǎng)?、叟囵B(yǎng)過程中需通空氣?、芄潭ɑ笾参锛毎L會變慢
【解析】 (1)外植體經(jīng)誘導形成愈傷組織的過程稱為脫分化。
(2)觀察圖示可知,12 d后蔗糖濃度和pH都下降到較低水平,影響能量的供應和酶的活性,導致細胞干重下降。另外,培養(yǎng)液中的蔗糖還具有調節(jié)滲透壓的作用。
(3)在細胞分裂過程中,用低溫或秋水仙素處理,都可抑制紡錘體的形成,使子染色體不能移向兩極,從而使細胞中染色體數(shù)目加倍。愈傷組織的細胞之間含有纖維素和果膠,欲將其分散成單個細胞,壓片前需用纖
15、維素酶和果膠酶處理。愈傷組織細胞經(jīng)誘導處理后,有的細胞染色體數(shù)目加倍(4n),有的細胞染色體數(shù)目未加倍(2n),也可能有的細胞在連續(xù)分裂中每次都因低溫或秋水仙素抑制了紡錘體的形成,導致細胞中染色體數(shù)目連續(xù)加倍,出現(xiàn)染色體數(shù)目為8n的細胞。所以染色體數(shù)目加倍到4n的細胞處于有絲分裂后期時染色體數(shù)目為8n,染色體數(shù)目加倍到8n的細胞處于有絲分裂中期時染色體數(shù)目也為8n。
(4)為了更好地獲得次生代謝產(chǎn)物,應選用生長旺盛的愈傷組織。愈傷組織細胞無葉綠體,不進行光合作用,因此不需要光照;培養(yǎng)過程要通入無菌空氣,確保細胞正常生命活動的進行。細胞的固定化通常使用包埋法,由于包埋材料的影響,營養(yǎng)物質和氧氣的擴散都受到一定的影響,所以固定化后植物細胞生長速度變慢。
【答案】 (1)脫分化 (2)蔗糖濃度下降,pH降低 提供能源 調節(jié)滲透壓 (3)秋水仙素(低溫) 果膠 經(jīng)加倍到4n的細胞處于有絲分裂后期 經(jīng)加倍到8n的細胞處于有絲分裂中期 (4)①③④
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